دراسة تأثير تحسس Apaf1 لمسارات الموت المبرمج/الموت الحارق التي يوسطها MPT على ترسيب الدهون في خلايا الكبد والدور التدخلي لحساء ديتيانغ
摘要
الهدف هو استكشاف ما إذا كانت حساء ديتيانغ (DTT) تحسن ترسيب الدهون في خلايا الكبد التي يسببها حمض الأوليك (OA) من خلال تنظيم عامل تنشيط الكاسباز 1 (Apaf1) الذي يستشعر فتحية النفاذية الغشائية للميتوكندريا (MPT) التي تتوسط مسارات موت الخلايا بالموت المبرمج/الموت الحارق. الطريقة: تم تحفيز خلايا سرطان الكبد البشري (HepG2) بتركيز 800 ميكرومول/لتر من OA لنموذج ترسيب الدهون في خلايا الكبد، وتم استخدام اختبار CCK-8 لتحديد أفضل ظروف تدخل لمصل الدم المحتوي على DTT ولمثبط Apaf1 المعروف بـ ZYZ488. ثم قسمت خلايا HepG2 إلى مجموعة ضابطة، مجموعة OA (800 ميكرومول/لتر)، مجموعة OA (800 ميكرومول/لتر) + مصل دم ضابط (SC) (10%)، مجموعة OA (800 ميكرومول/لتر) + DTT (10%)، ومجموعة OA (800 ميكرومول/لتر) + ZYZ488 (1 ميكرومول/لتر). تم تقييم تغيرات ترسيب الدهون في خلايا الكبد باستخدام صبغة Oil Red O، وقياسات مستويات ثلاثي الغليسيريد (TG) والأحماض الدهنية الحرة غير الأسمدة (NEFA). كما تم استخدام صبغات فلورية مثل Calcein AM وكاشف سيولة غشاء الميتوكوندريا (JC-1) للكشف عن فتح MPTP وتغير جهد غشاء الميتوكوندريا؛ كما جرى فحص عدد الخلايا الميتة بالموت المبرمج/الموت الحارق بواسطة التحليل الخلوي التدفق؛ وتقييم التعبير الجيني لـ Apaf1، GSDME، PARP1، Caspase-3، Caspase-4، Caspase-9 عبر تفاعل البلمرة الكمي في الوقت الحقيقي (Real-time PCR). كما تم الكشف عن تعبير Apaf1 باستخدام التألق المناعي، وتم تحليل البروتينات عبر تقنية Western blot. النتائج أظهر مصل دم الدي تي تي انخفاضًا ملحوظًا في مستويات TG وNEFA التي يسببها OA (P<0.01) وتحسنًا ملحوظًا في تراكم قطرات الدهون داخل خلايا الكبد. كما قمع مصل الدم فتح MPT المفرط وانخفاض جهد غشاء الميتوكوندريا (P<0.01). وبالإضافة إلى ذلك، خفض مصل الدم مستويات البروتينات والحمض النووي الريبوزي المرسال المرتبطة بمسار الموت المبرمج (Caspase-9/Caspase-3/PARP1) والموت الحارق (Caspase-4/Caspase-3/GSDME) التي ينظمها Apaf1 (P<0.05)، وكان تأثيره مشابهًا لتأثير ZYZ488. الخلاصة: يمكن لحساء ديتيانغ تحسين ترسيب الدهون في خلايا الكبد من خلال تثبيط مسارات الموت المبرمج والموت الحارق التي تتميز بحساسية Apaf1 لـ MPT.
关键词
ترسيب الدهون في خلايا الكبد;حساء ديتيانغ;عامل تنشيط الكاسباز 1 (Apaf1);ثقب نقل النفاذية للميتوكوندريا (MPT);الموت المبرمج;الموت الحارق
以上内容由讯飞翻译自动生成，翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果，本网站不承担任何商业和法律责任。
The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website