الهدف هو استكشاف آلية تثبيط الإيوبرولين (Eup) لتكاثر وانتشار سرطانات الرئة غير ذات الخلايا الصغيرة (NSCLC) من خلال مسار الإشارة المتمثل في Zeste عامل تعزيز النظير 2 / ثلاثي ميثيل الليسين 27 على الهيستون H3 (EZH2/H3k27me3). الطريقة: في التجارب الحية، تم إنشاء نموذج ورم تحت الجلد في الفئران العارية H1299 لتقييم تأثير Eup المضاد لـ NSCLC، وتم استعمال التلوين المناعي (IHC-P) لفحص تأثير Eup على التعبير البروتيني لمؤشرات التكاثر والانتشار: العامل النووي لبروتين التكاثر (PCNA)، المصفوفة المعدنية البروتينية (MMP)-2 و MMP-9 وعامل نمو الأوعية الدموية VEGFA. في التجارب الخلوية في المختبر، استُخدمت طريقة كشف التكاثر الخلوي (CCK-8) لتقييم نشاط خلايا H1299 بعد التعرض لتركيزات مختلفة من Eup (0~200 ميكرومول/لتر)، وتم اختيار التركيز المناسب. بفضل تجارب تكاثر الخلايا بالاستنساخ والاختبار الإيدوني (EdU)، تم تقييم تأثير Eup على تكاثر خلايا H1299؛ وبواسطة اختبار الخدش واختبار الاجتياز، تم تقييم تأثير Eup على هجرة وخطورة خلايا H1299؛ وبواسطة تجربة تكوين الأوعية باستخدام خلايا البطانة الوريدية السرية البشرية (HUVEC)، تم تقييم تأثير Eup على الأوعية الدموية؛ تم استخدام التحليل النسخي لاكتشاف أهداف Eup في خلايا H1299 ودراسة وظائفه الرئيسية، وتم تنفيذ المحاكاة الجزيئية والتصاق جزيئي للتنبؤ بقدرة الترابط وحالة الربط بين جزيء الدواء Eup وأهدافه؛ تم استعمال تفاعل التحسس المناعي الغربي (Western blot) لفحص تأثير Eup على بروتينات مسار EZH2/H3K27me3 والبروتينات المرتبطة بالتكاثر والانتشار PCNA، MMP-2، MMP-9 و VEGFA. النتائج: في نموذج الورم تحت الجلد لدى الفئران العارية، أظهرت مجموعة Eup تثبيطًا يعتمد على الجرعة لنمو أورام خلايا H1299 المزروعة (p<0.05) مقارنة بالمجموعة الضابطة، وارتفع معدل تثبيط الورم بشكل ملحوظ؛ أظهرت نتائج IHC-P انخفاضًا ملحوظًا في التعبير عن PCNA، MMP-2، MMP-9 و VEGFA في مجموعة Eup بجرعة عالية (p<0.05). في تجارب الخلايا الحية، ثبت أن Eup يثبط بشكل تركيزي تكاثر وخطورة وخلايا NSCLC مقارنةً بالمجموعة الضابطة؛ أظهر التحليل النسخي انخفاضًا ملحوظًا في تعبير EZH2 مرتبطًا بتثبيط انتقال الورم. كما أظهرت المحاكاة والتصاق الجزيئات استقرارًا وارتباطًا قويًا بين Eup و EZH2. كشفت اختبارات Western blot أن Eup يثبط بشكل كبير البروتينات EZH2، H3K27me3، PCNA، MMP-2، MMP-9 و VEGFA بحسب الجرعة سواء في الجسم الحي أو في المختبر (p<0.05). في التجارب الخلوية، عكس التعبير الزائد لـ EZH2 جزئيًا تثبيط Eup للبروتينات الرئيسية لتكاثر وانتشار خلايا H1299. الخلاصة: Eup يثبط بشكل فعال تكاثر وهجرة وخطورة خلايا H1299 في الجسم الحي وفي المختبر، وقد يرتبط ذلك بتثبيط مسار الإشارة EZH2/H3K27me3 وتثبيط التعبير البروتيني لمؤشرات التكاثر والانتشار PCNA، MMP-2، MMP-9 و VEGFA. الإيوبرولين هو عقار واعد محتمل مقاوم لتكاثر وانتشار NSCLC.

سرطان الرئة غير ذو الخلايا الصغيرة;الإيوبرولين;مسار إشارات Zeste عامل تعزيز النظير 2/ ثلاثي ميثيل الليسين 27 على الهيستون H3 (EZH2/H3K27me3);تكاثر;انتشار