الهدف هو دراسة تأثير مستخلص الماء من Zhi Mu (AR) على تحسين مرض الزهايمر (AD) في نماذج الفئران ودراسة آلية عمله المحتملة. الطريقة: تم حقن الفئران الذكور داخل الصفاق بد-جالاكتوز (100 ملغم/كغم) لمدة 42 يومًا، وفي اليوم الرابع عشر تم حقن محلول بروتين بيتا-أميلويد (Aβ₍25-35₎، 2 غ/ل) بحجم 1 ميكروليتر في منطقة الحصين. تم تقسيم الفئران عشوائيًا إلى مجموعة نموذج، ومجموعات مستخلص Zhi Mu بجرعات منخفضة (0.6 غ/كغم)، متوسطة (1.2 غ/كغم)، وعالية (2.4 غ/كغم)، ومجموعة علاج إيجابية (دونيبيزيل، 5 ملغم/كغم). تم أخذ مجموعة صحية أخرى وتم حقنها فقط بمحلول ملحي معقم 1 ميكروليتر في منطقة الحصين كمجموعة عملية وهمية؛ في اليوم الحادي والعشرين بدأت المجموعات المعالجة بالادخال عن طريق الفم، في حين أعطيت مجموعة الضابطة ونموذج الفئران محلول ملحي بحجم مماثل، مرة يوميًا لمدة 21 يومًا متتالية. تم تقييم ذاكرة التعلم لدى الفئران باستخدام اختبار متاهة الماء الخاص بموريس، وتم فحص تلف الأنسجة الدماغية بصبغة هيماتوكسيلين وإيوزين (HE). لوحظ موت الخلايا العصبية في الأنسجة الدماغية عن طريق تمييز وقف末端 التفاعل (TUNEL)، وتم قياس مستويات الإنترلوكين-1β (IL-1β)، وعامل نخر الورم-α (TNF-α)، والإنترلوكين-10 (IL-10) في الأنسجة الدماغية باستخدام تحليل الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA). بعد تعايش خلايا BV2 الصغيرة الميكروغليا مع 40 ميكرومول/لتر من Aβ₍25-35₎ لمدة ساعتين، تم تقييم بقاء الخلايا ونموها باستخدام اختبار (CCK-8) لاختيار أفضل تركيز لمصل يحتوي على Zhi Mu (S-AR). قُسمت التجارب الخلوية إلى مجموعات ضابطة، مجموعة Aβ₍25-35₎، مجموعة S-AR، مجموعة EX527 (مثبط المنظم الصامت 1 SIRT1)، ومجموعة S-AR+EX527. تم قياس تعبير CD16، CD206، وبروتين HMGB1 عالي التنقل باستخدام صبغة المناعة الفلورية؛ كما تم تقييم تعبير البروتينات المرتبطة بمسار الإشارات SIRT1/HMGB1/عامل النسخ النووي κB (NF-κB) باستخدام تقنية التلطيخ الغربي (Western blot) للتحقق من CD16، إنزيم أكسيد النتريك المستحث (iNOS)، CD206، أرجيناز (Arg) وSIRT1/HMGB1/ NF-κB. النتائج: أظهرت التجارب داخل الحيوان أن مجموعة النموذج أظهرت انخفاضًا في عدد مرات عبور المنصة ووقت الإقامة في الربع المستهدف (P < 0.01)، مع زيادة في فترة الهروب وخلايا عصبية تالفة في منطقة الحصين (P < 0.01)، وارتفاع في تعبير IL-6، TNF-α، IL-10، CD16، وiNOS (P < 0.01)، مع اتجاه لزيادة CD206 وArg لكن دون دلالة إحصائية. مقارنة بمجموعة النموذج، حسنت جميع جرعات مستخلص Zhi Mu عدد مرات عبور المنصة ووقت الإقامة في الربع المستهدف (P < 0.05، P < 0.01)، وقللت التلف في منطقة الحصين، وأدت لانخفاض فترة الهروب وموت الخلايا العصبية، بالإضافة إلى تقليل تعبير TNF-α، IL-6، CD16، وiNOS (P < 0.05، P < 0.01) مع زيادة تعبير IL-10، CD206، وArg (P < 0.05، P < 0.01). أظهرت دراسات المختبر زيادة في تعبير CD206، CD16، HMGB1، وiNOS (P < 0.01) في مجموعة Aβ₍25-35₎ مقارنة بمجموعة الضابطة، مع اتجاه زيادة لـCD206 وArg بدون دلالة إحصائية. بعد التدخل بـS-AR، زادت شدة CD206، وتعبير البروتينات Arg وCD206 (P < 0.01)، بينما انخفضت شدة CD16، HMGB1، وتعبير iNOS وCD16 (P < 0.01)، لكن هذه التأثيرات تم عكسها بواسطة EX527 (P < 0.05، P < 0.01). علاوة على ذلك، لوحظ ارتفاع عبارات HMGB1 السيتوبلازمي، ونسبة p-NF-κB p65/NF-κB p65 في مجموعة Aβ₍25-35₎ مع انخفاض SIRT1 وتعبير HMGB1 النووي (P < 0.01)، في حين أظهر S-AR عكس هذا الاتجاه، وقد أعادت EX527 عكس تأثيرات S-AR (P < 0.01). الخلاصة: يعمل Zhi Mu على تنظيم استقطاب الخلايا الميكروغليا من خلال مسار SIRT1/HMGB1/NF-κB مما يساهم في تحسين الالتهاب العصبي في نموذج مرض الزهايمر ويحمي الأنسجة.

Zhi Mu;مرض الزهايمر;استقطاب الخلايا الميكروغليا;منظم إشارة 1 الصامت (SIRT1)/بروتين HMGB1 عالي التنقل/عامل النسخ النووي-κB (NF-κB) مسار الإشارة