الهدف هو استكشاف تأثير وصفة إزالة الكدمات والتطهير على الخلايا البطانية الدقيقة للدماغ (BMECs) بعد إصابة نقص السكر ونقص الأكسجين (OGD) وآلية التدخل. الطريقة: استخدام مجموعة اختبار عد الخلايا (CCK-8) لتحديد وقت OGD، اختيار تركيز تأثير مصل الدواء لوصفة إزالة الكدمات والتطهير؛ تم تقسيم الخلايا عشوائياً إلى مجموعة وسط زراعة مصل فارغ (KBXQ)، ومجموعة النموذج (OGD)، ومجموعة HYXQ (OGD + مصل دواء وصفة إزالة الكدمات والتطهير)، ومجموعة 3-ميثيل أدينين (3-MA) (OGD + 3-MA). تم مراقبة شكل الخلايا تحت المجهر العكسي؛ تم مراقبة عدد الجسيمات الذاتية وحويصلات التحلل الذاتي داخل الخلايا تحت المجهر الإلكتروني؛ تم فحص معدل بقاء الخلايا باستخدام طريقة CCK-8؛ تم فحص معدل استماتة الخلايا بواسطة تقنية وضع العلامات الطرفية (TUNEL)؛ تم فحص تعبير البروتين LC3 و Occludin بواسطة تقنية المناعة الفلورية؛ تم فحص نفاذية طبقة الخلايا. تم تقسيم الخلايا عشوائياً إلى مجموعات KBXQ، والنموذج (OGD)، وHYXQ، ومثبط فوسفويلينوزيتيد-3-كيناز (PI3K) (LY294002) (OGD + LY294002)، ومجموعة HYXQ + LY294002 (OGD + مصل دواء وصفة إزالة الكدمات والتطهير + LY294002). تم فحص مستويات التعبير عن البروتينات المتعلقة بالاستماتة مثل Beclin1، LC3Ⅱ/LC3Ⅰ، p62، Occludin، p-PI3K، PI3K، p-Akt، Akt، p-mTOR، mTOR باستخدام تقنية Western blot. تم اختيار 6 ساعات من OGD كأفضل شرط لإنشاء النموذج و5% كمصل دواء أفضل تركيز. بالمقارنة مع مجموعة KBXQ، كانت الخلايا في مجموعة النموذج متضررة بوضوح تحت المجهر العكسي، وزاد عدد الحويصلات الذاتية وحويصلات التحلل الذاتي داخل الخلايا بشكل ملحوظ تحت المجهر الإلكتروني، وانخفض معدل بقاء الخلايا بشكل كبير (P<0.01)، وارتفع معدل الاستماتة (P<0.01)، وزادت شدة فلورة بروتين LC3 (P<0.01)، وانخفضت شدة فلورة بروتين Occludin (P<0.01)، وزادت نفاذية طبقة الخلايا بشكل ملحوظ (P<0.01)؛ بالمقارنة مع مجموعة النموذج، تحسنت حالة الخلايا في مجموعتي HYXQ و3-MA بشكل ملحوظ، وانخفض عدد الحويصلات الذاتية وحويصلات التحلل الذاتي داخل الخلايا، وزاد معدل بقاء الخلايا (P<0.01)، وانخفض معدل الاستماتة (P<0.01)، وانخفضت شدة فلورة بروتين LC3 (P<0.01)، وزادت شدة فلورة بروتين Occludin (P<0.01)، وانخفضت نفاذية طبقة الخلايا (P<0.05). أظهرت نتائج Western blot أنه بالمقارنة مع مجموعة KBXQ، زاد تعبير Beclin1 و LC3Ⅱ/LC3Ⅰ بشكل ملحوظ (P<0.01) في مجموعة النموذج، بينما انخفضت مستويات التعبير عن p62، Occludin، p-PI3K/PI3K، p-Akt/Akt و p-mTOR/mTOR (P<0.01)؛ بالمقارنة مع مجموعة النموذج، انخفض تعبير Beclin1 و LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0.01) وارتفعت مستويات التعبير عن p62، Occludin، p-PI3K/PI3K، p-Akt/Akt و p-mTOR/mTOR (P<0.01) في مجموعة HYXQ. في مجموعة LY294002، زاد تعبير Beclin1 و LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0.05، P<0.01) وانخفض تعبير p62، Occludin، p-PI3K/PI3K، p-Akt/Akt و p-mTOR/mTOR (P<0.01)؛ بالمقارنة مع مجموعة LY294002، انخفض تعبير Beclin1 و LC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0.01) وارتفعت مستويات تعبير p62، Occludin، p-PI3K/PI3K، p-Akt/Akt و p-mTOR/mTOR (P<0.01) في مجموعة HYXQ + LY294002. الخلاصة: وصفة إزالة الكدمات والتطهير لها تأثير حماية على خلايا BMECs المصابة بـ OGD، وربما يتم ذلك من خلال تنشيط مسار PI3K/Akt/mTOR المرتبط بالاستماتة، وكبح التعبير المفرط للاستقصاء الذاتي، مما يحمي بروتين Occludin ووظيفة الحاجز البطاني.

الخلايا البطانية الدقيقة للدماغ; الاستماتة; وصفة إزالة الكدمات والتطهير; فوسفويلينوزيتيد-3-كيناز (PI3K); بروتين كيناز B (Akt)