الهدف هو دراسة تأثير وصفة إزالة الكدمات وتطهير السموم على خلايا البطانة الوعائية الدقيقة في الدماغ (BMECs) بعد إصابة نقص الجلوكوز ونقص الأكسجين (OGD) وآلية التدخل. الطريقة: استخدام اختبار زيادة الخلايا والنشاط (CCK-8) لتحديد وقت OGD، واختيار تركيز تأثير مصل دواء وصفة إزالة الكدمات وتطهير السموم؛ تم تقسيم الخلايا عشوائيًا إلى مجموعة مصل دموي فارغ (KBXQ)، مجموعة نموذجية (OGD)، مجموعة HYXQ (OGD + مصل دواء وصفة إزالة الكدمات وتطهير السموم)، مجموعة 3-ميثيل أدينوزين (3-MA) (OGD + 3-MA). تم مراقبة شكل الخلايا تحت المجهر العاكس؛ مراقبة الأوتوفاجوسومات والأوتوليزوسومات داخل الخلايا تحت المجهر الإلكتروني؛ اختبار معدل بقاء الخلايا باستخدام CCK-8؛ اختبار معدل موت الخلايا المبرمج باستخدام طريقة تصنيف الأطراف الموحية (TUNEL)؛ الكشف عن تعبير البروتين LC3 المرتبط بالأنابيب الدقيقة، وبروتين الإغلاق (Occludin) عن طريق الفلورسنت المناعي؛ اختبار نفاذية الخلايا الأحادية. وتم تقسيم الخلايا عشوائيًا إلى مجموعة KBXQ، مجموعة نموذجية (OGD)، مجموعة HYXQ، مجموعة مثبط الفسفاتيديلينوسيتول 3-كيناز (PI3K) (LY294002) (OGD + LY294002)، مجموعة HYXQ+LY294002 (OGD + مصل دواء وصفة إزالة الكدمات وتطهير السموم + LY294002)، وتم الكشف عن مستويات تعبير البروتينات المفتاحية للأوتوفاجي مثل Atg6 متماثل الخميرة 1 (Beclin1)، LC3Ⅱ/LC3Ⅰ، بروتين الربط الانتقائي للأوتوفاجي (p62)، Occludin، الفسفرة (p)-PI3K، PI3K، p-بروتين كيناز B (Akt)، Akt، p-هدف راميسايسين (mTOR)، ومستوى تعبير بروتين mTOR باستخدام تقنية Western blot. النتائج: تم اختيار OGD لمدة 6 ساعات كأفضل ظروف للنموذج، و5% كنسبة مصل دواء وصفة إزالة الكدمات وتطهير السموم المثلى. بالمقارنة مع مجموعة KBXQ، كانت هناك تلف واضح للخلايا تحت المجهر العاكس في مجموعة النموذج، وزيادة واضحة في عدد الأوتوفاجوسومات والأوتوليزوسومات داخل الخلايا تحت المجهر الإلكتروني، وانخفاض كبير في معدل بقاء الخلايا (P<0.01)، وزيادة كبيرة في معدل موت الخلايا المبرمج (P<0.01)، وزيادة واضحة في شدة الفلورسنت لبروتين LC3 (P<0.01)، وانخفاض واضح في شدة الفلورسنت لبروتين Occludin (P<0.01)، وزيادة كبيرة في نفاذية الخلايا الأحادية (P<0.01)؛ مقارنة بمجموعة النموذج، كانت مجموعتا HYXQ و3-MA قد حسنتا تلف الخلايا بشكل واضح، مع تقليل واضح في عدد الأوتوفاجوسومات والأوتوليزوسومات داخل الخلايا، وزيادة كبيرة في معدل بقاء الخلايا (P<0.01)، وانخفاض كبير في معدل موت الخلايا المبرمج (P<0.01)، وانخفاض واضح في شدة فلورسنت بروتين LC3 (P<0.01)، وزيادة كبيرة في شدة فلورسنت بروتين Occludin (P<0.01)، وانخفاض في نفاذية الخلايا الأحادية (P<0.05). أظهرت نتائج Western blot، مقارنة بمجموعة KBXQ، زيادة واضحة في تعبير Beclin1 وLC3Ⅱ/LC3Ⅰ في مجموعة النموذج (P<0.01)، وانخفاض كبير في مستويات تعبير p62 وOccludin وp-PI3K/PI3K وp-Akt/Akt وp-mTOR/mTOR (P<0.01)؛ مقارنة بمجموعة النموذج، أظهرت مجموعة HYXQ انخفاضًا واضحًا في تعبير Beclin1 وLC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0.01)، وزيادة كبيرة في p62 وOccludin وp-PI3K/PI3K وp-Akt/Akt وp-mTOR/mTOR (P<0.01)، أظهرت مجموعة LY294002 زيادة واضحة في تعبير Beclin1 وLC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0.05، P<0.01)، وانخفاض كبير في تعبير p62 وOccludin وp-PI3K/PI3K وp-Akt/Akt وp-mTOR/mTOR (P<0.01)؛ بالمقارنة مع مجموعة LY294002، أظهرت مجموعة HYXQ+LY294002 انخفاضًا واضحًا في تعبير Beclin1 وLC3Ⅱ/LC3Ⅰ (P<0.01)، وزيادة كبيرة في p62 وOccludin وp-PI3K/PI3K وp-Akt/Akt وp-mTOR/mTOR (P<0.01). الخلاصة: وصفة إزالة الكدمات وتطهير السموم لها تأثير وقائي على خلايا BMECs المصابة بOGD، ومن المحتمل أن يكون ذلك من خلال تنشيط مسار PI3K/Akt/mTOR المرتبط بالأوتوفاجي، وكبح التعبير المفرط للأوتوفاجي، مما يحمي بروتين Occludin ووظيفة الحاجز البطاني.

خلايا البطانة الوعائية الدقيقة في الدماغ; الأوتوفاجي; وصفة إزالة الكدمات وتطهير السموم; فسفاتيديلينوسيتول 3-كيناز (PI3K); بروتين كيناز B (Akt)