الهدف هو بحث دور كبسولات TGBX في تنظيم موت الخلايا المبرمج المتميز (PANoptosis) في خلايا الغضروف وتأخير تدهورها، مما يحسن أعراض التهاب مفصل الركبة التنكسي (KOA). الطريقة: التجربة داخل الجسم: تم تقسيم 50 فأر ذكر من نوع C57BL/6 عشوائياً إلى مجموعات: مجموعة العملية الوهمية، مجموعة النموذج، مجموعات كبسولات TGBX بجرعات منخفضة وعالية، ومجموعة ديكلوفيناك الصوديوم، كل مجموعة تحتوي على 10 فئران. باستثناء مجموعة العملية الوهمية، تم استخدام طريقة Hulth المعدلة لإنشاء نموذج KOA في المجموعات الأخرى. بعد نجاح النمذجة، أعطيت مجموعات كبسولات TGBX مغذياً سائل بجرعات 7.2 و14.4 جم/كجم، ومجموعة ديكلوفيناك الصوديوم أعطيت 0.05 جم/كجم مغذياً مرة يومياً لمدة 6 أسابيع. تم تقييم النموذج باستخدام مؤشر شدة التهاب المفاصل Lequesne MG، وفحصت مفاصل الركبة باستخدام الأشعة المقطعية الميكروية (micro-CT)، وتمت دراسة شكل أنسجة الغضروف بواسطة تلوين HE وتلوين Safranin O-Fast Green، وفحص التراكيب المجهرية الدقيقة لموت الخلايا عبر المجهر الإلكتروني النافذ (TEM). باستخدام الفلورة المناعية المتعددة، تم دراسة co-localization لبروتينات cleaved Caspase-3 وRIPK3 وGSDMD-N في أنسجة الغضروف. باستخدام Western blot، تم قياس التعبير البروتيني لهذه العلامات في الغضاريف. التجربة في المختبر: استخدم جرذ SD عمر 4 أسابيع لإنشاء نظام زراعة خلايا الغضروف باستخدام طريقة الهضم الميكانيكية-0.2% كولاجين النوع الثاني. قسمت خلايا الغضروف للجيل الثاني إلى مجموعة ضابطة، مجموعة النموذج (معالجة LPS 10 ملجم/لتر لمدة 24 ساعة + Nigericin 1 ميكرومول/لتر لمدة 4 ساعات)، ومجموعة كبسولات TGBX (نفس المعالجات مع إضافة كبسولات TGBX 100 جم/لتر لمدة 24 ساعة). تم مراقبة مستويات ROS، وموت الخلايا المبرمج، والنخر، والفانيك عند خلايا الغضروف باستخدام مجاهر فلورية وصناديق تلوين AO/EB وYO-PRO-1/PI. تم فحص التغيرات فوق المجهرية لموت الخلايا باستخدام TEM. تم قياس محتويات IL-1β وIL-18 في المحلول الخلوي باستخدام ELISA. تم تحديد التعبير البروتيني لموت الخلايا وPANoptosis باستخدام Western blot. النتائج: مقارنة بمجموعة العملية الوهمية، كانت درجات Lequesne MG في مجموعة النموذج أعلى، مع تضييق في الفجوات المفصلية، زيادة نتوءات العظام، تلف غضروفي حاد، وزيادة معبر عنها إحصائياً في cleaved Caspase-3، RIPK3، وGSDMD-N ROS، وارتفاع ملحوظ في تعبيرات الصبغات والالتهابات. مقارنة بمجموعة النموذج، حسنت كبسولات TGBX المؤشرات السريرية والمجهرية، وخفضت درجات Lequesne MG، وسعة الفجوات المفصلية، وقللت من تلف الغضروف، وموت الخلايا، وPANoptosis مع تقليل مستويات ROS، IL-1β، وIL-18، والتعبير البروتيني للعوامل ذات الصلة. الخلاصة: تستطيع كبسولات TGBX تأخير تدهور خلايا الغضروف وتحسين أعراض KOA عن طريق تقليل الإجهاد التأكسدي وتنظيم التعبير البروتيني لـ PANoptosis مثل GSDMD-N، cleaved Caspase-3، وRIPK3.

كبسولات TGBX; التهاب مفصل الركبة; خلايا الغضروف; PANoptosis