آلية تنظيم نبات داشويتينغ لمسار إشارة BDNF/TrkB/CaMKⅡ/CREB لتخفيف الألم العصبي المرضي

WANG Fangfang ,  

HU Qiqi ,  

LIANG Dayi ,  

WU Jing ,  

WANG Long ,  

TANG Ting ,  

CHEN Peng ,  

摘要

الهدف هو استكشاف آلية عمل نبات داشويتينغ في تخفيف الألم العصبي المرضي (NP) باستخدام الصيدلة الشبكية، والتداخل الجزيئي، والتجارب الحيوانية. تم تحديد المكونات الكيميائية لنبات داشويتينغ باستخدام تقنية الكروماتوغرافيا السائلة عالية الفاعلية-طيف الكتلة عالي الدقة ذو المصيدة المدارية الرباعية الأقطاب (UHPLC-Q-Orbitrap HRMS). تم التنبؤ بالنقاط الأساسية والمسارات المتعلقة بتدخل النبات في NP من خلال الصيدلة الشبكية. تم تقسيم 48 فأر SD عشوائياً إلى مجموعة شلل كاذب، مجموعة نموذج، مجموعات جرعات منخفضة ومتوسطة وعالية من النبات (1.35، 2.7، 5.4 جم/كجم)، ومجموعة بريجابالين (30 ملغ/كجم). تم إعداد نموذج إصابة الضغط المزمن (CCI) لـ NP. تم قياس العتبة الانعكاسية للسحب الميكانيكي (MWT) والحراري (TWL) للفئران قبل العملية وبعد 3 و5 أيام، وبعد التدخل الدوائي في الأيام 3 و7 و11 و14. تم فحص التعبير عن علامة مثير للخلايا العصبية، الجين الطفري c-Fos، ومستقبل الناقل العصبي المشروط NK-1R عبر التحليل المناعي الفلوري (IF). تم تحليل التعبير ومستويات الفسفرة لبروتينات BDNF، TrkB، PLCγ، CaMKⅡα، و CREB في النخاع الشوكي باستخدام Western blot. وأُجري تحليل IF للبروتينات المفسفرة p-TrkB، p-PLCγ، p-CaMKⅡα، و p-CREB في النخاع الشوكي. أظهرت النتائج وجود 138 مركباً في النبات. كشفت الصيدلة الشبكية عن 409 نقاط مستهدفة محتملة تشمل 74 نقطة رئيسية مثل NTRK2، PTGS2، mTOR، Akt1، MAPK1. أظهرت نتائج التداخل الجزيئي أن NTRK2 تظهر تآزراً جيداً مع رودودين، أوكوبين، جينكجنسيتين، الكيرسيتين، هيسبيرتين، والكركمين. أظهرت الدراسات السلوكية أن MWT وTWL في مجموعة النموذج انخفضت بشكل ملحوظ (P<0.01). أظهر تحليل IF زيادة ملحوظة في c-Fos وNK-1R في النخاع الشوكي مقارنة بالمجموعة الضابطة (P<0.01) وانخفاضاً في مجموعة الجرعة العالية من النبات (P<0.01). أظهرت تحليلات Western blot وIF زيادة كبيرة في تعبير BDNF، TrkB، p-TrkB، PLCγ، p-PLCγ، CaMKⅡα، p-CaMKⅡα، CREB، و p-CREB في نموذج المجموعة مقارنةً بالمجموعة الضابطة (P<0.01)، وانخفاضاً واضحاً في مجموعة الجرعة العالية من النبات (P<0.01). الاستنتاج هو أن نبات داشويتينغ يخفف الألم العصبي المرضي من خلال تثبيط نشاط الخلايا العصبية والتكييف المركزي عبر مسار إشارة BDNF/TrkB/CaMKⅡ/CREB.

关键词

داشويتينغ;الألم العصبي المرضي;نشاط الخلايا العصبية;التكييف المركزي;عوامل التغذية العصبية الدماغية (BDNF)/مستقبلات كيناز التيروسين مهرجين (TrkB)/كيناز البروتين المعتمد على الكالسيوم والكالمودولين IIα (CaMKⅡα)/مركب ارتباط عنصر استجابة cAMP (CREB) مسار الإشارة

阅读全文