دراسة مدمجة لـ "التوصيف المجهرى-التحليل الكيميائي-تقييم الفعالية" لفهم مبدأ تعزيز تأثير جذر الأرسسبابير المحمص في التربة على تقوية الطحال وإيقاف الإسهال
الهدف من خلال تحليل التغيرات في البنية المجهرية والمكونات الكيميائية والتأثير المضاد لالتهاب القولون التقرحي (UC) قبل وبعد تحميص جذر الأرسسرائيلي (白术) في التربة، هو تفسير مبدأ تعزيز تأثير "تقوية الطحال وإيقاف الإسهال" لجذر الأرسسبابير المُحمّص في التربة. الطريقة: استخدام المجهر الإلكتروني الماسح - تحليل الطيف الطاقي (SEM-EDS) لتحليل البنية المجهرية وتركيب العناصر لجذر الأرسسبابير قبل وبعد تحميصه في التربة، لاستكشاف الفروق في البنية المجهرية وأسبابها؛ واستخدام التكرير السائل عالي الكفاءة - مطياف الكتلة رباعي القطبية - زمن الطيران (UPLC-Q-TOF-MS) جنباً إلى جنب مع منصة تحليل المنتجات الطبيعية UNIFI 1.9.2 لتحليل وتحديد المكونات الكيميائية لجذر الأرسسبابير النيئي والمحمص. وبالاستعانة بتحليل المكونات الرئيسية (PCA) والتحليل التمييزي بواسطة الانحدار الجزئي الأقل إزاحة (OPLS-DA)، تم استكشاف الفروق وأصول المكونات الكيميائية لكليهما؛ واستخدم نموذج فئران UC المُعد بواسطة السلفات ديكستران الصوديوم (DSS)، وتقييم مؤشر نشاط المرض (DAI) لتحديد شدة التهاب الأمعاء، وفحص التغيرات المرضية في أنسجة القولون عبر صبغة الهيماتوكسيلين والإيوزين (HE)، وتحليل مستويات عوامل الالتهاب باستخدام اختبار الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)، وتحليل التعبير الجيني والبروتيني للبحواجز المخاطية المعوية باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي الفوري (Real-time PCR) والتحليل المناعي بالبروتين (Western blot)، وتقنية 16S rRNA لتقييم تنوع الميكروبات المعوية، وتحليل مستويات الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة (SCFAs) في البراز باستخدام تقنية رأس الغاز-الكروماتوغرافيا-مطياف الكتلة (HS-GC-MS). بناءً على النتائج، استُكشفت تأثيرات تحميص جذر الأرسسبابير في التربة على الحواجز البيولوجية والكيميائية والميكانيكية والمناعية في الحيوانات النموذجية، ومقارنة تأثيراتها وآلياتها على حاجز الغشاء المخاطي للأمعاء في فئران UC. النتائج: كشف SEM عن وجود جزيئات تربة مكثفة على سطح جذر الأرسسبابير المحمص، مصحوبة بانتفاخات على شكل فقاعات، إضافة إلى شقوق وثنيات عديدة على سطح التربة المصاحبة. أظهر تحليل EDS أن مستويات العناصر Si, Al, Mg, Ca في جذر الأرسسبابير المحمص أعلى بكثير مقارنةً بالنيئي، وهي العناصر الرئيسية للتربة المصاحبة. باستخدام UPLC-Q-TOF-MS مع قاعدة بيانات، تم تحديد 132 مركباً كيميائياً في الوضع الإيوني الموجب بما في ذلك التربين والفينولات والأحماض الأمينية، و40 مركباً في الوضع الإيوني السالب بشكل رئيسي من الفينولات والجليكوسيدات. تميزت التربين السداسية والمتعددة والفينوليات بتغيرات واضحة بعد التحميص. يمكن لجذر الأرسسبابير المحمص تقليل درجات مؤشر مرض UC، تخفيف قصر طول القولون، وخفض مستويات عوامل الالتهاب مثل IL-17, IL-18, IFN-γ, TNF-α، وزيادة عوامل مضادة للالتهاب مثل sIgA, IL-10, IL-4, TNF-β. كما زاد التعبير الجيني لبروتينات الحاجز المخاطي مثل ZO-1, Occludin, Claudin-1, MUC2، وحسن تنوع الميكروبات ومستويات SCFAs (P<0.05 ، P<0.01). أظهر الجذر النيئي والمحمر تأثيرات مماثلة لكنها أضعف، بينما كانت للتربة المصاحبة بعض التأثيرات أيضاً. الخلاصة: يزيد التحميص في التربة من الحماية التي يوفرها جذر الأرسسبابير لحاجز الغشاء المخاطي في فئران UC، ويعود ذلك إلى التغيرات الداخلية للبنية المجهرية والمكونات الكيميائية بفعل التسخين بالإضافة إلى تأثير الامتزاز للتربة المصاحبة.
关键词
جذر الأرسسبابير;طريقة التحميص في التربة;توصيف مجهرى;المجهر الإلكتروني الماسح - تحليل الطيف الطاقي (SEM-EDS);تحليل كيميائي;UPLC-Q-TOF-MS;حاجز الغشاء المخاطي المعوي;مبدأ التحضير