دراسة تأثير وآلية وصفة بوشن تونغلو مثبطة لاستقطاب الخلايا البلعمية في تخفيف التليف الرئوي عبر مسار إشارة Wnt3a/β-catenin

LIANG Yanxia ,  

YU Xuelian ,  

WANG Wenwen ,  

LI Guangsen ,  

XING Hongfei ,  

FAN Maorong ,  

YANG Bin ,  

摘要

يهدف هذا البحث إلى دراسة ما إذا كان وصفة بوشن تونغلو (补肾通络方) تقوم بتثبيط استقطاب الخلايا البلعمية عن طريق تنظيم مسار الإشارة Wnt3a/بيتا-كاتينين (β-catenin)، مما يقلل من تحويل الخلايا الظهارية إلى خشنة وترسب المصفوفة خارج الخلية المفرط، وذلك لتوضيح آلية وصفة بوشن تونغلو المضادة للتليف الرئوي، وتوفير أسس نظرية جديدة للعلاج السريري للتليف الرئوي. الطريقة: تم تقسيم 50 جرذاً ذكراً من نوع SD عشوائياً إلى مجموعة ضابطة، مجموعة نموذجية، مجموعة بيرفينيدون، ومجموعات جرعات عالية ومنخفضة من وصفة بوشن تونغلو. باستثناء المجموعة الضابطة، تم حقن البليوميسين داخل القصبة الهوائية لبناء نموذج التليف الرئوي. بعد 28 يوماً من صناعة النموذج، أجري العلاج، حيث تلقت مجموعات الجرعات العالية والمنخفضة من وصفة بوشن تونغلو 30.88 و15.44 جم·كجم-1 عن طريق الإطعام المعدي، حصلت مجموعة بيرفينيدون على كبسولات بيرفينيدون 110 ملغم·كجم-1 عن طريق الإطعام المعدي، بينما تلقت المجموعتان الضابطة والنموذجية كمية معادلة من محلول ملحي طبيعي، مرة واحدة يومياً لمدة 90 يوماً. بعد العلاج، تم قياس مستوى عامل النمو المحول بيتا-1 (TGF-β1) في سائل غسل القصبات الهوائية والحويصلات (BALF) باستخدام اختبار الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)؛ وتمت مقارنة تغييرات شكل نسيج الرئة ونسبة حجم الكولاجين؛ وتم فحص توزيع وتعبير البروتينات مثل E-cadherin، Cytokeratin 19، α-SMA، Vimentin، Col I، Col III في نسيج الرئة باستخدام التفاعل المناعي النسجي؛ وتم تحديد توزيع وتعبير بروتينات CD68، Arg-1، iNOS، Wnt3a، وβ-catenin في نسيج الرئة باستخدام التفاعل المناعي الوميضي؛ وفحص التعبير البروتيني لـ Wnt3a وβ-catenin بواسطة Western blot؛ وتم قياس التعبير الجيني لـ Wnt3a وβ-catenin بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي الفوري (Real-time PCR). النتائج: مقارنة بالمجموعة الضابطة، لوحظ تسلل واسع للخلايا الالتهابية في جدران مجرى الهواء وحويصلات الرئة والأنسجة الخشنة في مجموعة النموذج، بالإضافة إلى زيادة ملحوظة في نسيج ليفي؛ ارتفع مستوى TGF-β1 في BALF بشكل ملحوظ؛ وانخفض تعبير بروتينات E-cadherin وCytokeratin 19، بينما ارتفع تعبير α-SMA، Vimentin، Wnt3a، β-catenin، Col I، Col III؛ وارتفعت نسبة المناطق الإيجابية للفلواروسين لـ CD68، Arg-1، iNOS، Wnt3a، β-catenin في أنسجة الرئة، وكذلك التعبير البروتيني وجينات mRNA لكل من Wnt3a وβ-catenin (P<0.01). مقارنة بمجموعة النموذج، حسنت المجموعات العلاجية بدرجات متفاوتة تسلل الخلايا الالتهابية والتليف في المجاري الهوائية والحويصلات والأنسجة الخشنة؛ خفضت مستوى TGF-β1 في BALF؛ رفعت التعبير البروتيني لـ E-cadherin وCytokeratin 19، وخفضت تعبيرات α-SMA، Vimentin، Col I، Col III في نسيج الرئة؛ خفضت نسبة المناطق الإيجابية للفلواروسين لـ CD68، Arg-1، iNOS، Wnt3a، β-catenin؛ وخفضت التعبير البروتيني وجينات mRNA لـ Wnt3a وβ-catenin (P<0.05، P<0.01). الخلاصة: يمكن لوصفة بوشن تونغلو تحسين التليف الرئوي المسبب بواسطة البليوميسين في الجرذان من خلال تثبيط تحويل الخلايا الظهارية إلى خشنة وتقليل ترسيب المصفوفة خارج الخلية المفرط، وربما عبر تثبيط مسار الإشارة Wnt3a/β-catenin التي تتحكم في استقطاب الخلايا البلعمية.

关键词

وصفة بوشن تونغلو;التليف الرئوي;استقطاب الخلايا البلعمية;مسار إشارة Wnt3a/β-catenin

阅读全文