الهدف هو استكشاف آلية عمل شوربة تعزيز البويضات في تثبيط التحلل الذاتي المفرط لخلايا حبيبات المبيض البشرية (KGN) وتحسين قصور المبيض المبكر (POI) عبر مسار إشارات فوسفوليبيد إينوزيتول 3-كينايز (PI3K)/بروتين كيناز ب (Akt)/بروتين الهدف للريبامايسين من النوع الثاني (mTOR). الطريقة: تم تحديد التركيز الأمثل لعقار السايكلوفوسفاميد على خلايا KGN لبناء نموذج POI باستخدام اختبار CCK-8. استنادًا إلى ذلك، تم اختبار تأثير مصل دم الشوربة المحتوي على أدوية على نشاط نموذج خلايا KGN. بعد تحديد التركيز الأنسب، قسمت خلايا KGN إلى مجموعات: المجموعة الضابطة (20% مصل دم فارغ)، مجموعة النموذج (20% مصل دم فارغ + 5 ميكرومول/لتر سايكلوفوسفاميد)، مجموعة مصل الشوربة المحتوي على أدوية (20% مصل الشوربة + 5 ميكرومول/لتر سايكلوفوسفاميد)، مجموعة مثبطات التحلل الذاتي (20% مصل دم فارغ + 5 ميكرومول/لتر سايكلوفوسفاميد + 20 ميكرومول/لتر هيدروكسيل كلوروكوين)، مجموعة مثبطات التحلل الذاتي + مصل الشوربة (20% مصل الشوربة + 5 ميكرومول/لتر سايكلوفوسفاميد + 20 ميكرومول/لتر هيدروكسيل كلوروكوين)، ومجموعة بوجيال (20% مصل بوجيال + 5 ميكرومول/لتر سايكلوفوسفاميد). بعد 48 ساعة من الزراعة، تم قياس معدل موت الخلايا المبرمج عبر قياس التدفق الخلوي وتحليل تعبير البروتينات ذات الصلة بالمسار عبر تقنية Western blot، كما تم فحص مستويات بروتينات التحلل الذاتي عبر تلوين MDC. النتائج: 5 ميكرومول/لتر من السايكلوفوسفاميد لعلاج خلايا KGN لمدة 48 ساعة أنشأ نموذج POI بوضوح، وقام بتثبيط تكاثر خلايا KGN. كان هناك ارتباط إيجابي بين تركيز السايكلوفوسفاميد وتثبيط النمو. مصل الشوربة عند 20% و30% عزز تكاثر الخلايا وخفف تأثير التثبيط. مقارنة بالمجموعة الضابطة، زادت نسبة موت الخلايا بشكل ملحوظ في مجموعة النموذج (P<0.01)، وانخفضت مستويات تعبير بروتينات PI3K و p-Akt و p-mTOR بشكل ملحوظ (P<0.01)، في حين ارتفعت بروتينات Beclin1 و LC3 و ATG5 المرتبطة بالتحلل الذاتي (P<0.01). لم تلاحظ تغيرات كبيرة في مستويات Akt و mTOR. لوحظ زيادة كبيرة في شدة الفلورسنت MDC (P<0.01). مقارنة بمجموعة النموذج، انخفضت معدلات موت الخلايا بشكل واضح في المجموعات المختلفة وتميزت مجموعة مثبطات التحلل الذاتي + مصل الشوربة بأفضل فعالية (P<0.05، P<0.01). كما زادت مستويات تعبير بروتينات PI3K و p-Akt و p-mTOR (P<0.05، P<0.01) بشكل ملحوظ وخاصة في مجموعة مثبطات التحلل الذاتي + مصل الشوربة (P<0.01). وانخفضت مستويات بروتينات Beclin1 و ATG5 (P<0.05، P<0.01). في مجموعتي مصل الشوربة وبوجيال، انخفض تعبير بروتين LC3 (P<0.05، P<0.01). مجموعة مثبطات التحلل الذاتي ومجموعتها مع مصل الشوربة أظهرت انخفاضًا في LC3 لكن دون دلالة إحصائية. الاستنتاج: قد تعمل شوربة تعزيز البويضات على تثبيط التحلل الذاتي المفرط عبر تفعيل مسار PI3K/Akt/mTOR، مما يعكس الضرر الناتج عن السايكلوفوسفاميد على نموذج خلايا KGN، ويعمل على تحسين POI.

شوربة تعزيز البويضات;قصور المبيض المبكر;سايكلوفوسفاميد;التحلل الذاتي