تأثير وصفة تعزيز الكلى وتحويل البلغم على تنظيم مسار إشارة HIF-1 في التحلل السكري الهوائي لخلايا MC3T3-E1
摘要
الهدف هو دراسة تأثير وصفة تعزيز الكلى وتحويل البلغم على التحلل السكري الهوائي لخلايا العظم الجنينية للفأر MC3T3-E1 بناءً على مسار إشارة عامل تنظيم نقص الأكسجة 1 (HIF-1)، واستكشاف آلية تدخل وصفة تعزيز الكلى وتحويل البلغم في هشاشة العظام بعد انقطاع الطمث (PMOP). الطريقة: تم تقسيم خلايا العظم الجنينية MC3T3-E1 للفأر إلى مجموعة ضابطة، ومجموعات تركيز منخفضة ومتوسطة وعالية من وصفة تعزيز الكلى وتحويل البلغم (0.01، 0.05، 0.1 جم/لتر)، ومجموعة إينيانغ هوانوسيد (0.1 جم/لتر). تم قياس نشاط التكوين العظمي وتكلس العقيدات في كل مجموعة باستخدام صبغة الفوسفاتاز القاعدي (ALP) وصبغة الألكارانين الأحمر (ARS)؛ وتمت مراقبة التغيرات في البنية فوق الدقيقة لميتوكندريا خلايا العظم والشبكة الإندوبلازمية الخشنة عبر المجهر الإلكتروني النافذ؛ وتم الكشف عن تعبير المؤشرات المتعلقة بالتكوين العظمي Runt المرتبط بعامل النسخ 2 (Runx2) والأجسام المضادة لعامل النسخ المرتبط بالعظم (Osterix) باستخدام الطرق المناعية المضيئة (IF)؛ وتم قياس مستويات البيروفات (PA) واللاكتيك (LA) في وسط الخلايا باستخدام اختبار الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)؛ وتم قياس معدل تحمض الخارج الخلوي (ECAR) باستخدام محلل التسرب Seahorse XF96؛ وتم قياس تعبير البروتينات HIF-1α، HIF-1β، PDK1، HK2، PKM2 باستخدام طريقة التربيت الغربي (Western blot)؛ وتم قياس تعبير mRNA لكل من HIF-1α، HIF-1β، PDK1، HK2، PKM2 بواسطة التفاعل التسلسلي للبوليمراز الكمي الفوري (Real-time PCR). النتائج بالمقارنة مع المجموعة الضابطة، ظهر تعبير ملون إيجابي واضح في ALP وARS في خلايا MC3T3-E1 لجميع مجموعات العلاج (P<0.05، P<0.01)؛ توسعت الشبكة الإندوبلازمية الخشنة داخل الخلية بشكل ملحوظ وزاد عددها، كما ازداد عدد الليسوزومات؛ ارتفع شدة الوميض لـ Runx2 وOsterix بشكل ملحوظ (P<0.01)؛ ارتفعت مستويات PA وLA في وسط الخلايا بشكل ملحوظ (P<0.01)؛ تم زيادة ECAR بشكل واضح في نفس فترات الوقت (P<0.05)؛ وزادت مستويات تعبير البروتين والـ mRNA لـ HIF-1α، HK2، PDK1، PKM2 بوضوح (P<0.05، P<0.01). الخلاصة: يمكن لوصفة تعزيز الكلى وتحويل البلغم تحفيز التحلل السكري الهوائي في خلايا العظم MC3T3-E1 عن طريق تنظيم تصاعدي لمسار إشارة HIF-1، مما يعزز تكوين العظم.
关键词
وصفة تعزيز الكلى وتحويل البلغم; هشاشة العظام بعد انقطاع الطمث; تمايز خلايا العظم; مسار إشارة عامل تنظيم نقص الأكسجة-1 (HIF-1); التحلل السكري الهوائي
以上内容由讯飞翻译自动生成，翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果，本网站不承担任何商业和法律责任。
The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website