الهدف هو مراقبة تأثير وصفة تنظيف العكارة وإزالة التصلب على نموذج الفئران المصابة بتآكل العظام الناتج عن النقرس، ودراسة آلية عملها. الطريقة: تم تقسيم 36 فأر SD ذكر عمره شهران عشوائياً إلى مجموعة ضابطة مكونة من 9 فئران ومجموعة نموذجية مكونة من 27 فأراً. تعرّضت الفئران في المجموعة النموذجية إلى محلول البسورين بجرعة 300 ملغ/كغ/يوم + محلول كبريتات البوتاسيوم بجرعة 250 ملغ/كغ/يوم عن طريق الفم مع حقن محيط الكاحل الأيمن بمعلق بلورات أحادي يورات الصوديوم (MSU) بتركيز 25 جم/لتر وحجم 200 ميكرولتر (مرة كل 3 أيام) لتحريض نموذج تآكل العظام الناتج عن النقرس. بعد 4 أسابيع من التكوين النموذجي، تم أخذ 3 فئران من كل مجموعة عشوائياً للتحقق من صحة النموذج. تم تقسيم 24 فأرًا نموذجًا عشوائياً إلى مجموعة نموذجية، مجموعة وصفة تنظيف العكارة وإزالة التصلب (10.35 جم/كغ/يوم)، مجموعة ألوبورينول (20 ملغ/كغ/يوم)، ومجموعة مثبط (LY294002، 10 ملغ/كغ/يوم)، 6 فئران لكل مجموعة. باستثناء مجموعة الضابطة، استمر إعطاء محلول البسورين (300 ملغ/كغ) + محلول كبريتات البوتاسيوم (250 ملغ/كغ) عن طريق الفم لجميع المجموعات الأخرى لاستمرار التدخل. تم علاج مجموعتي وصفة تنظيف العكارة وإزالة التصلب والألوبورينول بالجرعات المذكورة سابقًا عن طريق الفم، والمثبط عن طريق الحقن البطني، في حين تلقت المجموعتان الضابطة والنموذجية محلول ملحي عن طريق الفم لمدة 4 أسابيع متتالية. بعد انتهاء العلاج، لوحظ تورم مفصل الكاحل وقياس قطره لكل مجموعة؛ وتم استخدام التصوير المقطعي المجهري (Micro-CT) لمراقبة وتحليل كمية العظم وحجم السطح العظمي في مفصل الكاحل؛ كما تم استخدام صبغات الهيماتوكسيلين والإيوزين وصبغة فوران أوريجين شول لفحص التغيرات النسيجية في أنسجة مفصل الكاحل؛ تم قياس مستويات حمض اليوريك في مصل الدم باستخدام طريقة الإنزيم اللوني؛ وتم قياس عوامل الالتهاب مثل عامل النخر الورمي-α (TNF-α) والإنترلوكين 1β (IL-1β) والإنترلوكين 6 (IL-6) باستخدام اختبار الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)؛ تم فحص التعبير البروتيني لعامل نسخ نووي-κB وRANKL وبروتين الفسفرة PI3K باستخدام طريقة التألق المناعي؛ تم تحديد مستويات mRNA للبروتينات المرتبطة بتآكل العظام RANKL وTRAP وCTSK وMMP-9 باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي اللحظي (Real-time PCR)؛ تم تحليل التعبير البروتيني لكل من RANKL وCTSK وTRAP وMMP-9 وبروتينات مسار الإشارة PI3K/Akt/mTOR باستخدام تقنية Western blot. بالمقارنة مع مجموعة الضابطة، أظهرت مجموعة النموذج تورمًا واضحًا في مفصل الكاحل وزيادة في القطر؛ وأظهر التصوير المقطعي المجهري سطحًا غير مستوٍ مع تآكل عظمي بنمط خلايا النحل، مع انخفاض显张ار BV/TV وارتفاع BS/BV بشكل معنوي (P<0.05)؛ وتم ملاحظة ضيق في فجوة المفصل وتلف في الغضروف مع تناقص في عدد الخلايا الغضروفية والتوزيع غير المنتظم، ومظاهر تضخم جزئي، وعدم وضوح خط الحافة. وأكدت هذه النتائج نجاح بناء نموذج التآكل العظمي المرتبط بالنقرس. بعد 4 أسابيع من التدخل، أظهرت مجموعة النموذج تورمًا أكبر وقطرًا متزايدًا في مفصل الكاحل (P<0.05) مقارنة بالضابطة؛ وأكد التصوير المقطعي المجهري وجود نفس السمات السابقة في التآكل الهيكلي؛ وأظهرت النتائج المرضية تضيّق الفجوة المفصلية وتلف الغضروف؛ ارتفعت مستويات حمض اليوريك وعوامل الالتهاب (IL-1β وIL-6 وTNF-α) بشكل واضح (P<0.05)؛ كما تم رصد زيادة تعبير mRNA والبروتينات المرتبطة بتآكل العظام؛ وزيادة مستويات البروتينات المرتبطة بمسار الإشارة PI3K/Akt. وقد أظهرت مجموعات العلاج تحسنًا بدرجات متفاوتة في هذه المؤشرات. أظهرت مجموعة وصفة تنظيف العكارة وإزالة التصلب والمثبط تأثيرات أكثر وضوحًا في تقليل تورم المفصل وتحسين التآكل الهيكلي وتقليل عوامل الالتهاب وتثبيط مسار PI3K/Akt/mTOR (P<0.05). انخفضت مستويات حمض اليوريك في مصل الدم في مجموعتي وصفة تنظيف العكارة وألوبورينول (P<0.05). مقارنةً بمجموعة وصفة تنظيف العكارة، أظهرت مجموعة ألوبورينول زيادة في قطر مفصل الكاحل وتآكل عظمي وأكثر تلفًا في البنية الهيكلية، وكذلك مستويات أعلى من IL-6 وTNF-α والتعبير البروتيني المرتبط بالتآكل ومسار الإشارة (P<0.05). حققت مجموعة المثبط تحسينًا مماثلاً في البنية الهيكلية وتقليل IL-1β وIL-6، وكانت أفضل في خفض TNF-α وتثبيط تعبير البروتين ومسار الإشارة مقارنة بوصفة تنظيف العكارة ولكنها كانت أضعف في تحسين تلف الغضروف وخفض حمض اليوريك (P<0.05). الخلاصة: يمكن لوصفة تنظيف العكارة وإزالة التصلب تقليل مستوى حمض اليوريك في الدم وتقليل إفراز عوامل الالتهاب وخفض التعبير البروتيني المتعلق بتآكل العظام في أنسجة المفاصل، وآلية عملها في تحسين تآكل العظام قد تكون مرتبطة بتثبيط مسار الإشارة PI3K/Akt.

وصفة تنظيف العكارة وإزالة التصلب; التهاب المفاصل النقرسي المزمن; تآكل العظام الناتج عن النقرس; فسفاتيديلين إينوزيتول 3-كيناز (PI3K)/كيناز البروتين B (Akt) مسار الإشارة; الالتهاب