الهدف هو دراسة الأساس الدوائي وآلية عمل وصفة تعزيز الكلى وتنشيط الحبل الشوكي وتأثيرها المضاد للالتهابات. تم استخدام تقنية الكروماتوغرافيا عالية الكفاءة - مصفوفة الأيونات الخطية - مصفوفة مدارات المجال الكهربائي بدقة عالية (UPLC-LTQ-Orbitrap-MS) لتحديد المكونات الكيميائية لوصفة تعزيز الكلى وتنشيط الحبل الشوكي ومكوناتها الممتصة في الجسم. استخدمت الصيدلة الشبكية لاختيار المكونات النشطة الممتصة والأهداف المحتملة، وبناء شبكة التفاعل بين البروتينات (PPI) للنقاط الأساسية، وتحليل الإثراء للنقاط المشتركة، والتحقق من قدرة الارتباط بين المكونات الرئيسية والأهداف من خلال التزاوج الجزيئي. تم استخدام أسماك الزبرا المعدلة وراثيًا Tg(mpx:GFP) لإنشاء نموذج التهاب للتحقق داخل الجسم، حيث تم تقسيم صغار أسماك الزبرا بعد ثلاثة أيام من الإخصاب (3 dpf) عشوائيًا إلى مجموعة فارغة، مجموعة نموذجية، مجموعة إيجابية بمادة أسيتات ديكساميثازون (75 ميكرومول/لتر)، ومجموعات جرعات منخفضة ومتوسطة وعالية من وصفة تعزيز الكلى وتنشيط الحبل الشوكي (500، 1000، 2000 ملغ/لتر)، وتمت مراقبة توزيع وعدد العدلات في كيس المح في المجهر الفلوري. استخدم تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (Real-time PCR) لفحص التعبير الجيني لمستقبلات نظيرة تول 4 (TLR4) وعامل التمايز النقوي 88 (MyD88) وعامل النسخ النووي κB (NF-κB) وعوامل الالتهاب سيتوكينات IL-1β وIL-6 وعامل نخر الورم-α (TNF-α). النتائج حددت 120 مكونًا كيميائيًا في الوصفة، وتم تأكيد 26 مكونًا أصليًا في المصل. حددت الصيدلة الشبكية 227 هدفًا مشتركًا بين التهاب المفاصل الروماتويدي (RA) والمكونات الممتصة، وتبين أن آلية العمل تشمل تأثيرات مركبات مثل الأسكوبيتين، الأرجنين بيتا، الألليسين، الغليكوزيدات المريرة، سينامالدهايد والميثيل إيفيدرين على الأهداف الأساسية مثل بروتين كيناز B1 (Akt1)، عامل تفعيل النسخ 3 (STAT3)، عامل نخر الورم (TNF)، TLR4، MAPK14، ووحدة التحفيز PIK3CA، مما ينظم مسارات إشارات TLR4 وNF-κB ويؤدي إلى تأثير مضاد للالتهابات. أظهر التحقق داخل أسماك الزبرا أن أقصى تركيز تحمل للوصفة هو 2000 ملغ/لتر. مقارنة بالمجموعة الفارغة، أظهرت المجموعة النموذجية زيادة ملحوظة في عدد العدلات في كيس المح (p<0.01)، وزيادة في التعبير الجيني لـ TLR4، MyD88، NF-κB، TNF-α، IL-6 و IL-1β (p<0.05، p<0.01). مقارنة بالمجموعة النموذجية، خفضت مجموعات الجرعات المتوسطة والعالية والوصفة بالإضافة إلى أسيتات ديكساميثازون بشكل ملحوظ عدد العدلات (p<0.05، p<0.01)، لم يظهر الاختلاف في المجموعة ذات الجرعة المنخفضة دلالة إحصائية، وتم تقليل التعبير الجيني لـ TLR4، MyD88، NF-κB، TNF-α، IL-6 و IL-1β بشكل ملحوظ (p<0.05، p<0.01). الاستنتاج حدد مبدئيًا الأساس الدوائي لوصفة تعزيز الكلى وتنشيط الحبل الشوكي، وأكد أن الوصفة تؤدي تأثيرها المضاد للالتهابات من خلال مسار الإشارات TLR4/MyD88/NF-κB، مما يوفر أساسًا علميًا للتطبيقات السريرية المستقبلية.

وصفة تعزيز الكلى وتنشيط الحبل الشوكي; نموذج التهاب أسماك الزبرا; مستقبل Toll-like 4 (TLR4); عامل التمايز النقوي 88 (MyD88); عامل النسخ النووي-κB (NF-κB)