الهدف هو دراسة آلية تدخل تركيبة الأعشاب الصينية فايبي تانغ 2 في التليف الرئوي مجهول السبب، مع التركيز على تأثيرها على إجهاد الشبكة الإندوبلازمية، والاستماتة، والحفاظ على القدرة الجذعية وقدرة التجديد في خلايا الحويصلات الهوائية من النوع الثاني (AT2)، والتحقق من مسار التحول الحديث لنظرية "ضعف الزونغ تشي - تليف الحويصلات الهوائية". تم استخدام نموذج تليف الرئة في الفئران المستحث بواسطة بليوميسين (BLM)، وتم تعيين مجموعة فارغة، مجموعة نموذج، ومجموعات فايبي تانغ 2 بجرعات منخفضة وعالية (9.1 و 18.2 جم·كجم^-1) ومجموعة بريدنيزولون أسيتات (6.5 مجم·كجم^-1). تم تقييم تغييرات بنية نسيج الرئة وترسيب الكولاجين باستخدام تلوين الهيماتوكسيلين وإيوزين (HE) وتلوين ماسون (Masson)، وتم قياس محتوى الهايدروكسي برولين (HYP) بواسطة التحليل القاعدي، بالإضافة إلى قياس معامل الرئة ومؤشرات وظيفة الرئة. تم استخدام تفاعل البلمرة المتسلسل الكمي الفوري (Real-time PCR) للكشف عن مستويات تعبير mRNA لعوامل التليف المتعلقة بكولاجين النوع الأولα1 (ColⅠa1)، وأكتين العضلات الملساءα-SMA، ومانع إنزيم ميتالوبروتيناز النسيج 1 (Timp1). تم تقييم الاستماتة باستخدام تقنية التأشير بواسطة إنزيم ترانسفيراز الديوكسي نيوكليوتيد المعروف باسم طريقة TUNEL، وتم تقييم استماتة خلايا AT2 باستخدام صبغة مزدوجة غير مناعية لبروتين السطح SPC وكاسبيز-3 (Caspase-3)، كما تم تقييم حالة إجهاد الشبكة الإندوبلازمية في خلايا AT2 عن طريق صبغة مزدوجة SPC وبروتين كيناز الارتباط بالركائز داخل الشبكة الإندوبلازمية (PERK)، ومراقبة التغيرات المجهريا الدقيقة في هيكل الشبكة الإندوبلازمية والأجسام الطبقية لخلايا AT2 باستخدام الميكروسكوب الإلكتروني النافذ. تم تقييم التعبير البروتيني للبروتينات الرئيسية التي تشارك في مسارات إجهاد الشبكة الإندوبلازمية والاستماتة PERK، وعامل النسخ المنشط 4 (Atf4)، وكاسبيز-3 باستخدام تقنية Western blot. تم تحليل قدرة تكاثر خلايا AT2 باستخدام تأشير مناعي مزدوج لبروتينات SPC ومستضد Ki-67، وتم استخدام تقنية تتبع السلالة (GFP⁺ فئران) مجتمعة مع تأشير Krt8 للكشف عن حالة منتصف التمايز، ومراقبة تحول خلايا AT2 إلى خلايا الحويصلات الهوائية من النوع الأول (AT1). أظهرت النتائج أن تحريض BLM تسبب في تدمير كبير لبنية نسيج الرئة، وزيادة ترسيب الكولاجين، وارتفاع معامل الرئة، وتراجع وظيفة الرئة، وارتفاع التعبير لعوامل التليف (P<0.01). التدخل بجرعة عالية من فايبي تانغ 2 يحسن بشكل ملحوظ تلف نسيج الرئة واضطراب الوظيفة، ويخفض محتوى HYP (P<0.01)، ويخفض التعبير عن ColⅠa1، α-SMA، وTimp1 (P<0.01). أظهر تحليل الاستماتة زيادة نسبة الخلايا الموجبة لتقنية TUNEL في مجموعة النموذج، وزيادة ملحوظة في معدل خلايا AT2 الإيجابية لكاسبيز-3، في حين أن المجموعة ذات الجرعة العالية شهدت انخفاضًا ملحوظًا. أظهر الفحص بالمجهر الإلكتروني وجود تورم في هيكل الشبكة الإندوبلازمية لخلايا AT2 للتحريض، ومال نحو الطبيعي بعد العلاج؛ أظهر تحليل صبغة بروتين PERK استجابة إجهاد الشبكة الإندوبلازمية واضحة في خلايا AT2 في مجموعة النموذج، وتحسن كبير في المجموعة المعالجة. زاد التعبير عن بروتينات إجهاد الشبكة الإندوبلازمية PERK، وAtf4، وبروتين الاستماتة كاسبيز-3 في مجموعة النموذج، وانخفض بشكل ملحوظ بعد العلاج. أدت اضطرابات هيكل الأجسام الطبقية في مجموعة النموذج إلى تعريب العلاج إلى استعادة. بالنسبة لقدرة تكاثر خلايا AT2، زادت نسبة الخلايا الإيجابية لـ Ki-67⁺SPC⁺ بشكل ملحوظ في المجموعة المعالجة (P<0.01). أظهر تتبع السلالة زيادة في نسبة خلايا Krt8⁺GFP⁺ في مجموعة النموذج مشيراً إلى انسداد التمايز، في حين أن هذه النسبة انخفضت بشكل ملحوظ في المجموعة المعالجة، مع تحول خلايا GFP⁺ إلى شكل مسطح ممتد، مشيراً إلى استعادة التمايز باتجاه AT1. الخلاصة: يعمل فايبي تانغ 2 على إصلاح الرئة عن طريق التخفيف من إجهاد الشبكة الإندوبلازمية في خلايا AT2، تقليل الاستماتة في هذه الخلايا، استعادة هيكل ووظيفة الأجسام الطبقية، تعزيز نشاط تكاثرها، وتخفيف انسداد التمايز لتعزيز التمايز باتجاه خلايا AT1، مما يمنع تقدم التليف الرئوي. كما يتوافق مبدأ العلاج الصيني التقليدي لـ "إعادة الزونغ تشي، تنشيط تشي والدم، وتنشيط مسارات الرئة" بشكل كبير مع مسار تنظيم خلايا AT2 الجذعية الحديث، مما يوفر أساسًا نظريًا وتجريبيًا جديدًا لتدخلات الأعشاب الصينية في تليف الرئة مجهول السبب.

التليف الرئوي مجهول السبب; انسداد التجدد; الاستماتة; إجهاد الشبكة الإندوبلازمية; القدرة الجذعية; تشي الزونغ; فايبي تانغ 2