تأثير حساء هوانغلان لتحييد السموم على تسرب العدلات داخل دماغ فئران MCAO من خلال تنظيم تعبير عوامل الكيمياء الحيوية في الحويصلات الخارجية

ZHANG Haojia ,  

WANG Kai ,  

SUN Zijin ,  

WANG Chunyu ,  

SHAO Wei ,  

LIU Kunjing ,  

DONG Liyang ,  

CHEN Dan ,  

XU Wenxiu ,  

WANG Chuanzun ,  

WANG Wen ,  

LI Changxiang ,  

WANG Xueqian ,  

CHENG Fafeng ,  

WANG Qingguo ,  

摘要

الهدف هو دراسة ما إذا كان يمكن لحساء هوانغلان لتحييد السموم أن يثبط تسرب العدلات داخل دماغ الفئران التي تعاني من انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO) من خلال تنظيم تعبير عوامل الكيمياء الحيوية المرتبطة بالعدلات داخل الحويصلات الخارجية، وبالتالي تحقيق التأثير العلاجي. الطريقة: تم تقسيم 130 فأرًا ذكورًا من نوع C57BL/6J بدرجة SPF إلى 4 مجموعات عشوائيًا: مجموعة جراحة صورية، مجموعة نموذج MCAO، مجموعة حساء هوانغلان لتحييد السموم (6 جم/كجم) ومجموعة جيننادو (21.6 ملغ/كجم)، حيث كانت مجموعة جيننادو تحتوي على 10 فئران والمجموعات الثلاث الأخرى كل منها 40 فأرًا. تم إعطاء مجموعتي حساء هوانغلان وجيننادو عن طريق القناة الفموية يوميًا بحجم جرعة 0.15 مل لكل 10 جم لمدة 7 أيام متتالية، في حين أعطيت مجموعتا الجراحة الصورية والموديل نفس الحجم من محلول ملحي في نفس الطريق. بعد 7 أيام، تم إجراء عملية انسداد الشريان الدماغي الأوسط للفئران، حيث تم ربط نهاية الوريد السباتي الأيمن (CCA) من الجانبين القريب والبعيد، وأُجري شق صغير بين هاتين الربطتين، ثم تم إدخال خيط سيليكون مغطى برأس دائري إلى التجويف لمنع الوريد السباتي، واستُخدم الخيط لمدة ساعة لبناء نموذج نقص التروية الدماغي البؤري. بعد 24 ساعة من النمذجة، أُجريت الفحوصات التالية: تقييم حالة الوظائف العصبية بواسطة مقياس لونغا، وصبغ TTC لقياس حجم احتشاء الدماغ، وتصوير الرشاش الليزري لمراقبة تدفق الدم الدماغي، وصبغ HE وصبغ نيسل لتقييم التغيرات المرضية في نسيج الدماغ، وفصل الحويصلات الخارجية من بلازما الدم ونسيج الدماغ عبر الطرد المركزي السريع وتصنيفها حسب الحجم باستخدام المجهر الإلكتروني النافذ (TEM) وتحليل العلامات البروتينية (Western blot). تم بناء مكتبة وتحليل تسلسل RNA طويل السلسلة في الحويصلات الخارجية، واستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (Real-time PCR) للكشف عن التعبير الجيني لعوامل الالتهاب والكيمياء الحيوية المرتبطة بالعدلات في الحويصلات الخارجية من بلازما الدم ونسيج الدماغ في كل مجموعة، واختبار ELISA لقياس البروتينات المرتبطة بها، والفحص المناعي الكيميائي لتحديد التعبير البروتيني الخاص بالعدلات - إنزيم المايلوبيروكسيديز (MPO) في الدماغ. النتائج: بالمقارنة مع مجموعة الجراحة الصورية، انخفضت بشكل ملحوظ درجات الوظائف العصبية في مجموعة الموديل (P<0.01)، وظهرت احتشاءات دماغية بارزة (P<0.01)، وانخفض تدفق الدم في الدماغ بشكل كبير (P<0.01)، وحدث موت خلوي في الدماغ، وانخفض عدد أجسام نيسل بشكل ملحوظ (P<0.01)، وارتفع تعبير mRNA للبروتينات IL-1β، MPO، CXCL1، CXCL2، CXCL3، CXCL10، CCL2، وCCL3 داخل الحويصلات الخارجية في بلازما الدم ونسيج الدماغ (P<0.05، P<0.01)، وزاد تعبير البروتينات داخل الحويصلات الخارجية في نسيج الدماغ (P<0.05، P<0.01)، كما ارتفع معدل إيجابية MPO وكثافة الإضاءة المتوسطة في الدماغ (P<0.01). بالمقارنة مع مجموعة الموديل، ارتفعت درجات الوظائف العصبية بشكل ملحوظ في مجموعتي حساء هوانغلان وجيننادو (P<0.05)، وانخفض حجم الاحتشاء الدماغي بشكل ملحوظ (P<0.01)، وتحسن تدفق الدم في الدماغ (P<0.01)، وقل عدد الخلايا الميتة في الدماغ وزاد عدد أجسام نيسل (P<0.01)، وانخفض تعبير mRNA للبروتينات داخل الحويصلات الخارجية في بلازما الدم ونسيج الدماغ في مجموعة حساء هوانغلان (P<0.05، P<0.01)، كما انخفض تعبير البروتينات داخل الحويصلات الخارجية في نسيج الدماغ وعدد إيجابية MPO وكثافة الإضاءة (P<0.01). الخلاصة: يمكن لحساء هوانغلان لتحييد السموم تعديل التعبير الجيني لعوامل الكيمياء الحيوية المرتبطة بالعدلات داخل الحويصلات الخارجية في بلازما الدم ونسيج الدماغ للفئران المصابة بنموذج MCAO، مما يقلل من تسرب العدلات داخل الدماغ لتحقيق التأثير العلاجي.

关键词

حساء هوانغلان لتحييد السموم;السكتة الدماغية الإقفارية;الحويصلات الخارجية;عوامل الكيمياء الحيوية;تسرب العدلات

阅读全文