الهدف تهدف هذه الدراسة إلى استكشاف خصائص إعادة برمجة الأيض خلال عملية إصابة نقص التروية الدماغية-إعادة التدفق من خلال تقنية التسلسل الجيني المفرد للخلايا، وتحليل تغايرية مجموعات الخلايا الصغيرة (ميكروجليا)، وتقييم تأثير خلطة هوانغ ليان جي دو تانغ على اضطرابات الأيض والالتهاب العصبي. الطرق استخدمنا نموذج انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO) لإنشاء سكتة دماغية إقفارية في الفئران. قمنا بمراقبة تغيرات تدفق الدم الدماغي المحلي باستخدام تصوير تبعثر الليزر، وتقييم الضرر الوظيفي العصبي بواسطة تقييم Zea-Longa، وفحص الأنسجة الدماغية المريضة باستخدام تلوين الهيماتوكسيلين والإيوسين (HE) وتلوين نيسل. قُسمت الحيوانات إلى مجموعات شملت العمليات الوهمية، النموذجية، خلط هوانغ ليان جي دو تانغ، ومستخلص نبات الجنكو بيلوبا. بعد تكيف واحد للأسبوع مع الغذاء، بدأت المعالجة عن طريق الفم: مجموعتا العمليات الوهمية والنموذجية تلقتا محلول ملحي، مجموعة خلطة هوانغ ليان جي دو تانغ تلقت 1.82 جم/كجم، ومجموعة مستخلص الجنكو بتركيز 2.16 جم/لتر 0.432 جم/كجم بمعدل 0.2 مليلتر/(10 جم) يومياً لمدة 5 أيام. في اليوم السادس، تم إجراء نمذجة tMCAO بعد الجرعة الأخيرة. على المستوى الجزيئي، تم إجراء تسلسل RNA أحادي الخلية لأنسجة نصف الكرة المخية المصابة. تم استخدام تحليل مصفوفة غير سالبة (NMF) لتجميع مجموعات ميكروجليا الفرعية، جنباً إلى جنب مع تحليل التعبير التفريقي، تقييم إعادة برمجة الأيض، وتحليل ارتباط العوامل الالتهابية لفهم وظائفها في إصابة نقص التروية الدماغية-إعادة التدفق. تم إجراء تحليل إثراء عوامل النسخ لتحديد نقاط التنظيم الرئيسية. وأخيراً، تم التحقق من تغيرات التعبير في الجينات المستهدفة باستخدام التفاعل البوليميرازي المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (Real-time PCR) للتحقق من بيانات تسلسل الخلية المفردة. النتائج بالمقارنة مع مجموعة العمليات الوهمية، أظهرت المجموعة النموذجية زيادة معنوية في درجات الوظيفة العصبية (P<0.01)، انخفاضاً كبيراً في تدفق الدم (P<0.01)، اضطراب بنية القشرة، زيادة في تفريغ السيتوبلازم وزيادة أجسام نيسل. مقارنة بالمجموعة النموذجية، أظهرت مجموعتا خلطة هوانغ ليان جي دو تانغ ومستخلص الجنكو انخفاضاً معنوياً في درجات الوظيفة العصبية (P<0.01)، وزيادة في تدفق الدم (P<0.01)، تحسناً في هيكل القشرة، انخفاض في تفريغ السيتوبلازم، وتقليل أجسام نيسل. أظهر التحليل الخلوي المفرد أن ميكروجليا تنقسم إلى 5 مجموعات فرعية، حيث أظهرت المجموعتان 3 و5 مظهر تعزيز الالتهاب مع تنشيط ملحوظ لمسار NF-κB ونقص الأكسجة كمجموعات مؤيدة للالتهاب؛ في حين أن المجموعتين 1 و2 تجمعا مسارات Wnt/β-catenin وعامل النمو المحول-β (TGF-β)، مع خصائص واضحة للتثبيط والشفاء. في المجموعات المؤيدة للالتهاب، تم تحفيز جينات تحلل الجلوكوز مثل HK2، PFKP، وLDHA. أظهر مستوى التعبير للعوامل الالتهابية ارتباطاً إيجابياً مع جينات تحلل الجلوكوز، بينما أظهر التعبير لعوامل التثبيط والشفاء ارتباطاً سلبياً، مما يشير إلى اعتماد ميكروجليا على مسار تحلل الجلوكوز للحصول على الطاقة في بيئة نقص التروية. كشفت تسلسل الجينات المفردة أن خلطة هوانغ ليان جي دو تانغ تقلل بفعالية التعبير عن الجينات الرئيسية لإعادة برمجة الأيض (مثل HK2، PFKP، LDHA)، وتقلل بشكل ملحوظ نسبة مجموعات الميكروجليا المصاحبة لتحلل الجلوكوز، وتمنع تحوّلها إلى مظاهر إصابة، مما يقلل من الضرر الالتهابي. مقارنة بمجموعة العمليات الوهمية، أظهرت المجموعة النموذجية زيادة معنوية في التعبير الجيني لـ IL-1β، IL-6، TNF-α، CCL2، CXCL2، CSF3 (P<0.01)، وتراجعاً في التعبير الجيني المتعلق بوظيفة الخلايا البطانية والخلية المحيطة مثل RGS5، PECAM1، VEGFB، NOS3 (P<0.01). مقارنة بالمجموعة النموذجية، أظهرت مجموعتا خلطة هوانغ ليان جي دو تانغ ومستخلص الجنكو انخفاضاً معنوياً في التعبير الجيني لـ IL-1β، IL-6، TNF-α، CCL2، CXCL2، CSF3 (P<0.01)، وزيادة في التعبير الجيني لوظائف الخلايا البطانية والخلية المحيطة (RGS5، PECAM1، VEGFB، NOS3) (P<0.01). الخلاصة يمكن لخلطة هوانغ ليان جي دو تانغ أن تحمي الأعصاب عن طريق تنظيم إعادة برمجة الأيض في خلايا الميكروجليا، والحد من الالتهاب العصبي، ما يقي من تلف الأعصاب.

التسلسل الجيني المفرد للخلايا;خلايا الميكروجليا;إعادة برمجة الأيض;خلطة هوانغ ليان جي دو تانغ;الالتهاب العصبي