الهدف هو تحسين طريقة استخراج مكونات بكتين الأعشاب المجلدة، وتحليل وتقييم البنية الأولية للمكون المستخلص والمنقى (BP-1) وتأثيره الخافض لسكر الدم في سمك الزبرا المصاب بالسكري. استخدمت طريقة شبه محاكاة لاستخراج المكونات، حيث تم دراسة العلاقة بين نسبة المادة السائلة وزمن ودرجة حرارة الاستخراج باستخدام طريقة Box-Behnken وتحسين عملية الاستخراج. تم عزله وتنقيته بواسطة طريقة سيفاج والكروموتوغرافيا على عمود السليلوز DEAE-52 للحصول على BP-1. تم التحقق من نقاء بكتين الأعشاب المجلدة وتركيب السكريات الأحادية، البنية الحلزونية الثلاثية والمجموعات الوظيفية باستخدام قياس الطيف فوق البنفسجي والمرئي (UV)، تحليل كروماتوغرافيا الغاز - مطياف الكتلة (GC-MS)، اختبار كونغو الأحمر والطيف بالأشعة تحت الحمراء (FT-IR)؛ وتمت مراقبة البنية المجهرية باستخدام المجهر الإلكتروني الماسح (SEM) ومجهر القوة الذرية (AFM). تم تقسيم سمك الزبرا إلى مجموعات: مجموعة ضابطة، ومجموعات BP-1-1، BP-1-10، BP-1-50، BP-1-200، BP-1-1000، وتمت إضافة محاليل BP-1 بمختلف التركيزات إلى وسط E3 وعرض الأجنة لمدة 96 ساعة لتقييم تأثير BP-1 على البقاء، التشوه ومعدل ضربات القلب. تم إنشاء نموذج السكري عند الزبرا بتحفيزهم بسكر الغلوكوز وفورمازول، وتمت معالجة المجموعات المختلفة بمحاليل BP-1 بجرعات مختلفة، ومجموعتا الضابطة والموديل بمحلول ملحي. تم قياس مستويات الجلوكوز والأنسولين باستخدام ELISA، وتأثير BP-1 على الكبد تم تقييمه من خلال التحليل النسيجي باستخدام HE والطريقة PCR الكمية الحية لجينات الجلوكاجون، الأنسولين وPCK1. تم تحديد أفضل ظروف استخراج: نسبة مادة إلى سائل 1:40، 66 دقيقة عند 79 درجة مئوية، مع معدل استخراج 10.34 ± 0.96%. تحليل UV أظهر خلو BP-1 من البروتين والأحماض النووية؛ GC-MS حدد مكوناته من ستة سكريات أحادية: الأراكوز، الرامانوز، الريبوز، المانوز، الجالاكتوز والجلوكوز؛ اختبار كونغو الأحمر أظهر عدم وجود بنية لولبية ثلاثية؛ تحليل FT-IR أشار لاحتوائه على روابط ألفا-جليكوسيد وحموضة السكريات؛ تحليلات SEM وAFM أوضحت تركيب غير منتظم ووجود تكتلات نتيجة تداخل سلاسل الجزيئات وروابط هيدروجينية داخلية. تم تحديد أقصى تركيز يتحمله سمك الزبرا 200 ملغ/لتر. أظهرت نتائج الفعالية خفضًا ملحوظًا للجلوكوز وارتفاعًا ملحوظًا للأنسولين في مجموعة BP-1-50 مقارنة بالموديل. الرصد النسيجي أظهر تحسينًا في نسيج الكبد مع BP-1، خاصة في مجموعة BP-1-200. تحليل التعبير الجيني أظهر تعديلًا إيجابيًا في جينات السكري ضمن المجموعة العلاجية. الخلاصة: طريقة الاستخراج شبه المحاكاة فعالة، بسيطة ومنخفضة التكلفة، مناسبة للإنتاج الصناعي. BP-1 يحتوي على ستة سكريات أحادية وروابط ألفا-جليكوسيد وحمض السكريات، ويملك نشاطًا خافضًا للسكر ويحمي كبد نماذج السكري من سمك الزبرا.
关键词
بكتين الأعشاب المجلدة;طريقة الاستخراج شبه المحاكاة;توصيف التركيب;النشاط الخافض للسكر;تحسين العملية;السكري