الهدف هو دراسة ما إذا كان بإمكان شاي هوانغلانغ جيدي تونغ ومكوناته النشطة الرئيسية (جينينينينغلايد، هوانغشينغلايد، والبربيرين) تثبيط التفاعل الالتهابي في خلايا BV2 تحت تحفيز الليبوبوليسكاريد (LPS) من خلال مسار الإشارة بروتين الحركية عالية التنقل B1 (HMGB1) / مستقبل شبيه Toll 4 (TLR4) / عامل النسخ النووي-κB (NF-κB)، وفي الوقت نفسه دراسة الفروق في الفعالية بين المونومرات الثلاثة ومزيج المونومرات ومركب شاي هوانغلانغ جيدي تونغ تحت نفس نسبة المحتوى. الطريقة: تم استخدام خلايا BV2 الصغيرة ككائن البحث الرئيسي، وتم فحص تأثير تركيزات مختلفة من ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO) (0.8%, 0.4%, 0.2%, 0.1%, و0.05%) على نشاط الخلايا باستخدام اختبار CCK-8. تم مراقبة تأثير تركيزات مختلفة من شاي هوانغلانغ جيدي تونغ (200، 100، 50، 25، 12.5 و6.25 ملغم/لتر) على حالة نمو الخلايا بواسطة Incucyte، كما تم اختبار أكسيد النيتريك (NO) لاختيار أفضل تركيز للدواء. تم تحليل محتوى الجينينينينغلايد، هوانغشينغلايد، والبربيرين في الشاي بواسطة كروماتوغرافيا عالية الأداء (HPLC) ووضعت المجموعات بناءً على نسب المحتوى. تم فحص تأثير الأدوية على نشاط الخلايا واختبار العوامل الالتهابية في سوائل الخلايا بواسطة ELISA. تم قياس تأثير الأدوية على استقطاب M1 لخلايا BV2 بواسطة الفحص الخلوي بالتدفق، وتم فحص التعبير البروتيني لـ HMGB1، TLR4 وNF-κB بواسطة ويسترن بلوت. النتائج: مقارنة بمجموعة التحكم، لم يؤثر DMSO بتركيز 0.2% أو أقل على نشاط الخلايا خلال 48 ساعة (P>0.05). عند تركيز 200 ملغم/لتر من شاي هوانغلانغ جيدي تونغ، وصلت الخلايا إلى مرحلة الاستقرار بعد 24 ساعة، وتحت تحفيز LPS بتركيز 2 ملغم/لتر، قلل الشاي من إفراز NO بشكل أفضل، وكان العلاج المسبق لمدة 6 ساعات أكثر فاعلية في تثبيط NO مقارنة بالعلاج المباشر. أظهرت نتائج HPLC أن كل 1 ملغم من مسحوق الشاي المجفف يحتوي على حوالي 24 ميكروغرام جينينينينغلايد، 15 ميكروغرام هوانغشينغلايد، و30 ميكروغرام بربيرين. تم تعيين المجموعات التالية: التحكم، LPS بتركيز 2 ملغم/لتر، شاي هوانغلانغ جيدي تونغ 200 ملغم/لتر، مجموعة المونومرات المختلطة، جينينينينغلايد 4.8 ملغم/لتر، هوانغشينغلايد 3 ملغم/لتر، وبربيرين 6 ملغم/لتر. مجموعة المونومرات المختلطة هي مزيج مركب من المكونات النشطة الثلاثة. لم تؤثر LPS والشاي ومكوناته النشطة على نشاط الخلايا مقارنةً بمجموعة التحكم. مقارنة بمجموعة التحكم، زادت LPS بشكل كبير العوامل الالتهابية TNF-α، IL-1β، IL-6، وIL-10 (P<0.01) في سوائل الخلايا. خفض الشاي ومكوناته العوامل الالتهابية TNF-α، IL-1β، IL-6 (P<0.05، P<0.01) ورفعوا العامل المضاد للالتهاب IL-10 (P<0.01)، وكان للمونومرات المختلطة أفضل قدرة على تثبيط الالتهاب (P<0.05، P<0.01). زاد LPS بشكل كبير نسبة خلايا BV2 التي تعبر CD80+CD86+ (نوع M1) (P<0.01) مقارنة بمجموعة التحكم، وأظهر الشاي ومكوناته تثبيط واضح لاستقطاب M1 في خلايا BV2 (P<0.05، P<0.01) مع أفضل تأثير في مجموعة المونومرات المختلطة (P<0.05، P<0.01). زاد LPS تعبير بروتينات HMGB1، TLR4، وNF-κB بشكل ملحوظ (P<0.01)، في حين انخفض التعبير بشكل واضح بعد تدخل الشاي ومكوناته الفعالة (P<0.05، P<0.01)، مع أفضل تأثير لمجموعة المونومرات المختلطة (P<0.05، P<0.01). الخلاصة: يمكن لشاي هوانغلانغ جيدي تونغ ومكوناته النشطة الأساسية (جينينينينغلايد، هوانغشينغلايد، وبربيرين) تثبيط الالتهاب في خلايا BV2 المحفزة بـ LPS. كما يُظهر مزيج المكونات الثلاثة فعالية أفضل في تثبيط الالتهاب، مع تخفيف واضح لاستقطاب نوع M1 في خلايا BV2 عبر مسار الإشارة HMGB1/TLR4/NF-κB.

شاي هوانغلانغ جيدي تونغ; فحص HPLC; خلايا BV2 الصغيرة; استقطاب نوع M1; بروتين الحركية عالية التنقل B1 (HMGB1) / مستقبل شبيه Toll 4 (TLR4) / عامل النسخ النووي-κB (NF-κB) مسار الإشارة