الهدف هو استكشاف آلية عمل حبوب شنج وتهدئة السعال (SPZP) في تحسين الربو القصبي (AS) عن طريق تنظيم استجابة الإجهاد في الشبكة الإندوبلازمية المسببة لموت الخلايا باستخدام علم النسخ والتحقق التجريبي. تم تقسيم 60 جرذاً من نوع SD عشوائياً إلى مجموعات: مجموعة فارغة، مجموعة نموذجية، مجموعة دواء إيجابي (ديكساميثازون حقن، 0.125 ملغم/كغم)، ومجموعات SPZP بجرعات منخفضة ومتوسطة وعالية (540، 1080، 2160 ملغم/كغم)، كل مجموعة بها 10 حيوانات. تم استخدام حقن داخل الصفاق بمزيج من ألبومين البيض وألمنيوم هيدروكسيد إلى جانب تحفيز بالرش لتأسيس نموذج AS، وبعد التأكد من النجاح، تمت المعالجة لمدة 21 يوماً. تم دراسة التغيرات المرضية في أنسجة الرئة باستخدام صبغة الهيماتوكسيلين وإيوزين (HE)؛ وتم قياس مستويات IgE المناعي في مصل الجرذان باستخدام اختبار الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)؛ وتمت مراقبة الشبكة الإندوبلازمية والهياكل فوق الدقيقة لموت الخلايا باستخدام المجهر الإلكتروني النافذ (TEM)؛ وأجريت تحليلات تسلسل الحمض النووي الريبي (RNA-seq) على أنسجة الرئة لاستكشاف آليات التأثير الجزيئية لـ SPZP؛ وتم الكشف عن معدل موت الخلايا باستخدام صبغة TUNEL؛ وتم تقدير مستويات بروتينات CHOP، Bax، وBcl-2 باستخدام تقنية Western blot. كما تم إنشاء نموذج تلف للخلايا الظهارية القصبية البشرية (BEAS-2B) بواسطة تحفيز ليبوبوليساكاريد، وتم تقسيمها إلى مجموعة فارغة، مجموعة نموذجية، ومجموعات SPZP منخفضة ومتوسطة وعالية الجرعة باستخدام المصل الحاوي على الدواء. وتم مراقبة الشكل الخلوي باستخدام الميكروسكوب التصويري؛ ومراقبة الهيكل فوق الدقيق للشبكة الإندوبلازمية بالمجهر الإلكتروني؛ وتقييم معدل موت الخلايا عن طريق قياس التدفق الخلوي (Flow cytometry)؛ وفحص تراكم بروتين CHOP في نواة الخلية باستخدام التألق المناعي (IF)؛ وقياس تعبيرات mRNA لبروتينات الشبكة الإندوبلازمية المرتبطة GRP78، ATF6، Bax، Bcl-2 بواسطة PCR الكمّي ؛ وتم تقييم مستويات البروتينات المذكورة إلى جانب Caspase-3 المقطوع بواسطة Western blot. أظهرت النتائج الحيوانية أن مجموعة النموذج كانت تعاني من أعراض شبيهة بالربو مقارنة بالمجموعة الفارغة مع تسارع التنفس والسعال وتناقص النشاط، وتغييرات مرضية في أنسجة الرئة مثل تساقط طلاء الجهاز التنفسي، تسلل خلايا الالتهاب، سُمك جدار الهواء، واتساع الشبكة الإندوبلازمية، وتكدس الكروماتين، وتقلص النواة، وارتفاع مستوى IgE في المصل (P<0.01). وقد حسّنت مجموعات SPZP تلك الأعراض (P<0.01). أظهر تحليل RNA-seq وجود 515 جين تغير في المجموعة النموذجية مقارنة بالفارغة، و1852 جين اختلاف بين مجموعة الجرعة العالية والنموذجية، مع 74 جينًا مشتركًا مرتبطًا بالربو، وموت الخلايا، ومسارات معالجة البروتينات في الشبكة الإندوبلازمية. أظهرت صبغة TUNEL وتقنيات Western blot زيادة ملحوظة في معدل موت الخلايا وتعزيز تعبيرات CHOP وBax، مع انخفاض Bcl-2 في الحمير النموذجية (P<0.01)، فيما تحسّنت هذه المؤشرات بشكل ملحوظ في مجموعات SPZP (P<0.01). أظهرت التجارب الخلوية زيادة بجرعة معتمدة في معدل بقاء خلايا BEAS-2B (P<0.01)، وتحسين في شكل الخلايا، وتقليل في تكدس الكروماتين وتضرر الشبكة الإندوبلازمية، وانخفاض معدل موت الخلايا (P<0.01)؛ كما تم تقليل تعبيرات mRNA و البروتينات GRP78، ATF6، Bax، وcleaved Caspase-3 (P<0.05، P<0.01)، مع زيادة Bcl-2 (P<0.05، P<0.01). الخلاصة، تؤكد الأدلة المختبرية والحيوية أن تدخل SPZP في AS قد يكون مرتبطًا بتنظيم نشاط مفرط لمسار الإشارات GRP78/ATF6/CHOP، مما يخفف من موت الخلايا الظهارية الناجم عن إجهاد الشبكة الإندوبلازمية.

الربو القصبي; حبوب شنج وتهدئة السعال; علم النسخ; استجابة إجهاد الشبكة الإندوبلازمية; موت الخلايا الظهارية