الهدف هو دراسة الآلية الجزيئية التي من خلالها يمنع ديفينولك أسيد B (SalB) التحول الطلائي-اللحمي (EMT) في سرطان الرئة غير صغير الخلايا (NSCLC) عن طريق خفض تعبير إنزيم فوسفورريبوز أمينيميداز كربوكسيلاز / سينثيتاز الأميد السكري (PAICS). تم استخدام خلايا سرطان الرئة غير صغير الخلايا A549 وخلايا الظهارة القصبية الطبيعية (BEAS-2B) كنماذج. تم تقييم نشاط الخلايا بعد معالجة SalB بتركيزات 0، 50، 100، 200، 300، 400، 500 ميكرومول/لتر لمدة 24 أو 48 ساعة باستخدام اختبار CCK-8 لتحديد التركيز الفعال والآمن. تم تقييم تأثير SalB على تكاثر خلايا A549 ودورتها وخضوعها للموت المبرمج باستخدام صبغة EdU والفحص الخلوي بالتدفق. تم تقييم تأثيره على هجرة الخلايا وغزوها باستخدام تجارب خدش وتجارب Transwell. تم استخدام تحليل التسلسل الفايروسي والتقنيات المعلوماتية الحيوية لتحديد الجينات المختلفة الوظائف والتراكمات الوظيفية. تم التنبؤ بارتباط SalB بـ PAICS من خلال التقارب الجزيئي، وقُيِّم تأثير SalB على استقرار درجة حرارة بروتين PAICS باختبار CETSA. تم تقييم تعبير البروتينات ذات الصلة بإمتحان Western blot، بما في ذلك PAICS وبروتينات EMT مثل E-الكاتبدين وN-الكاتبدين والفيمينتين وسنايل وسلاغ. تم إجراء تجارب استعادة الوظيفة بعد نقل بلازميد PAICS لزيادة تعبيره. بالمقارنة مع المجموعة الضابطة، خفض SalB نشاط خلايا A549 بشكل تركيزي (P<0.05)، بينما لم يظهر تأثير مثبط على تكاثر خلايا BEAS-2B عند تركيز ≤300 ميكرومول/لتر. ضمن هذا النطاق، قمع SalB تكاثر، وهجرة، وغزو خلايا A549، وحفز التوقف في مرحلة G0/G1 والموت المبرمج (P<0.05). أظهر التحليل النسخي انخفاضاً ملحوظاً في تعبير PAICS وتركيزات عالية ضمن الوظائف المتعلقة بتكاثر الخلايا وEMT. أظهرت المعلومات الحيوية تعبير عالي لـ PAICS في سرطان غدة الرئة مرتبط بسوء التنبؤ (P<0.01). بين التقارب الجزيئي قدرة ارتباط قوية بين SalB وPAICS (-9.1 kcal/mol)، ورفع SalB الاستقرار الحراري لبروتين PAICS (P<0.05). أوضحت Western blot أن SalB يثبط تعبير PAICS بشكل تركيزي ويرفع E-الكاتبدين وينقص N-الكاتبدين والفيمينتين وسنايل وسلاغ (P<0.05). أظهرت تجارب الاستعادة أن زيادة تعبير PAICS عززت تكاثر هجرة غزو خلايا A549، وعززت تقدم دورة الخلية وكبتت الموت المبرمج (P<0.05). كما عكس زيادة PAICS جزئياً تأثير SalB المثبط للخصائص الخبيثة والبروتينات ذات الصلة بـ EMT (N-الكاتبدين، الفيمينتين، سنايل، سلاغ) وخفض التعبير E-الكاتبدين (P<0.05، P<0.01)، مما يشير إلى أن PAICS هو الهدف الوظيفي الحاسم لتأثيرات SalB المضادة للورم. الخلاصة: يمنع SalB فعلاً عملية EMT وتقدم دورة الخلية في خلايا A549 عبر تثبيط تعبير PAICS، مما يؤثر على سرطان الرئة غير صغير الخلايا. تكشف الدراسة أن PAICS هو الهدف الوظيفي الرئيسي لتنظيم SalB لـ EMT وتوفر أساساً تجريبياً لاستخدام SalB كدواء مرشح لمنع انتشار NSCLC.

سرطان الرئة غير صغير الخلايا;ديفينولك أسيد B;فوسفورريبوز أمينيميداز كربوكسيلاز;التحول الطلائي اللحمي;الهجرة والغزو