Auswirkungen der kombinierten Abkochung von Herba Ephedrae und Artemisiae annuae auf die ex-vivo-Kultur von Treg/Th17-Lymphozyten bei Patienten mit HBV-assoziiertem akutem rezidivierendem Leberversagen

ZENG Menghui ,  

DU Shan ,  

TAN Nianhua ,  

PENG Jie ,  

CHEN Bin ,  

摘要

Das Ziel dieser Studie war es, die regulatorische Wirkung der kombinierten Abkochung von Artemisiae annuae (AA) und Herba Ephedrae (HE) (Reinigungsmethode-Aufwärmemethode-Kombinierte Methode) auf die Expression regulatorischer T-Zellen (Treg) / Hilfe-T-Zellen 17 (Th17) im ex-vivo-Kultur von Patienten mit HBV-assoziiertem akutem rezidivierendem Leberversagen (HBV-ARLF) zu untersuchen. Methoden Frische periphere Blutproben wurden von Patienten mit HBV-ARLF gesammelt und Monozytenzellen wurden durch Ficoll-Gradientenzentrifugation isoliert. Treg-Komplexe und naive CD4-T-Zellen wurden durch Immunmagnetismus isoliert. Naive CD4-T-Zellen wurden nach expandierter Ex-vivo-Differenzierung in Th17-Zellen und die Medikamentenplasmen der Reinigungsmethode (Abkochung von AA), der Aufwärmemethode (Abkochung von HE) und der kombinierten Methode (kombinierte Abkochung von AA und HE, d.h. Tonifizierung-Materialentfernung-Stausedimentation) sowie Plasmen von nüchternen Wistar-Ratten (Kochsalzlösung) wurden hergestellt, und die Zellen jeder Gruppe wurden mit dem entsprechenden Plasma behandelt. Die Häufigkeit von Treg / Th17 wurde durch Durchflusszytometrie gemessen, die Expression des Wachstumsfaktors Transforming-β (TGF-β) durch ELISA, die Expression von Interleukin (IL)-10, IL-17A, des Tumornekrosefaktor-α (TNF-α) und von IL-23 durch CBA, die Expression des mRNA von Foxhead Box P3 (FoxP3) und des nukleären Retinoid-X-Rezeptors-γt (ROR-γt) durch Echtzeit-PCR gemessen und die Expression der Proteine FoxP3 und ROR-γt durch Westernblot gemessen. Ergebnisse Nach der Intervention mit Medikamentenplasmen der Reinigungsmethode, der Aufwärmemethode und der kombinierten Methode, im Vergleich zur Kontrollgruppe, verringerte sich die Häufigkeit von Treg / Th17 der Gruppe der kombinierten Methode, die Treg-Faktoren TGF-β, IL-10 und die Th17-Faktoren TNF-α, IL-17A, IL-23 verringerten sich signifikant, die Expression des mRNA und der Proteine von FoxP3, ROR-γt verringerte sich signifikant (P < 0,01). Im Vergleich zur Gruppe der Reinigungsmethode, verringerte sich die Häufigkeit von Treg, die mRNA und die Proteine von FoxP3 in der Gruppe der kombinierten Methode, aber die Unterschiede waren nicht statistisch signifikant, die Häufigkeit von Th17, die Treg-Faktoren TGF-β, IL-10 und die Th17-Faktoren TNF-α, IL-17A, IL-23 verringerten sich, die Expression der mRNA und der Proteine von ROR-γt verringerte sich signifikant (P < 0,05, P < 0,01). Im Vergleich zur Gruppe der Aufwärmemethode, verringerte sich die Häufigkeit von Treg, die mRNA und die Proteine von FoxP3 in der Gruppe der kombinierten Methode, aber die Unterschiede waren nicht statistisch signifikant, die Häufigkeit von Th17, die Treg-Faktoren TGF-β, IL-10 und die Th17-Faktoren TNF-α, IL-17A, IL-23 verringerten sich, die Expression der mRNA und der Proteine von ROR-γt verringerte sich signifikant (P < 0,05). Fazit Die kombinierte Methode kann die spezifische Expression von Transkriptionsfaktoren von Treg / Th17 nach unten regulieren, die Hyperaktivierung von Treg / Th17 hemmen, die Sekretion von Treg-Faktoren TGF-β, IL-10, TNF-α, IL-17A, IL-23 reduzieren, die entzündliche Reaktion des Leberversagens mildern und die Prognose der Patienten verbessern.

关键词

HBV-assoziiertes akutes rezidivierendes Leberversagen;regulatorische T-Zellen (Treg);Hilfe-T-Zellen 17 (Th17);entzündliche Reaktion;Reinigungsmethode-Aufwärmemethode-Kombinierte Methode

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