Ziel war es, den möglichen Mechanismus zu untersuchen, durch den die Kapsel zur Entgiftung von Winddispers SDJD die virale Lungenentzündung durch das H1N1-Influenzavirus lindert, wobei der Schwerpunkt auf ihrer Wirkung auf den Toll-ähnlichen Rezeptors (TLR)-Signalweg in den epithelialen Atemwegszellen lag. Es wurde ein Modell für die Viruspneumonie erstellt, indem Mäuse mit dem Stamm A/PR/8/34 (PR8) des Influenzavirus infiziert wurden. Die Mäuse wurden zufällig in die Normalgruppe, die mit PR8 infizierte Gruppe und die SDJD-Gruppe (8,4 g·kg^-1) aufgeteilt, jeweils mit 10 Mäusen. Der Tag der Infektion war Tag 1, und die SDJD-Gruppe erhielt täglich eine orale Dosis von 20 mL·kg^-1, während der Normalgruppe und der PR8-Gruppe ein entsprechendes Volumen deionisiertes Wasser verabreicht wurde. Am Tag 5 wurde ein Mikro-CT-Scan durchgeführt und die Lungen der Mäuse wurden zur Berechnung des Lungenindexes disseziert, um die Wirksamkeit des Medikaments zu überprüfen; differenziell exprimierte Gene in den epithelialen Atemwegszellen wurden mittels Einzelzell-Sequenzierung analysiert; die Expression des Adhäsionsmoleküls der epithelialen Zellen (EpCAM), TLR, TRAF6 und MyD88 in TLR-positiven Zellen wurde mittels Multi-Color-Immunohistochemie nachgewiesen und der Anteil der epithelialen Atemwegszellen berechnet, die TLR Signalwegproteine exprimierten; die epithelialen Atemwegszellen wurden mittels Durchflusszytometrie isoliert; die Expression von TLR, MyD88, TRAF6, dem Induktionsfaktor für ein Interferon mit Adapterstrukturdomäne eines Interleukin-Rezeptors (TRIF), der alpha-Untereinheit des inhibitorischen Kinas der Nuclear Factor Kappa B (IKKalpha) und des Nuclear Factor Kappa B (NF-alpha) in den isolierten epithelialen Zellen wurde mittels Immunoblotting (Western blot) nachgewiesen; die Konzentration von Interleukin-1 beta (IL-1beta) und Tumornekrosefaktor-alpha (TNF-alpha) im Lungengewebe wurde mittels eines enzymgebundenen Immunosorbens-Assays (ELISA) gemessen. Auf Transkriptom-Ebene war die SDJD in der Lage, den Trend der Genexpression des TLR-Signalwegs in den epithelialen Atemwegszellen umzukehren und die Expression mehrerer mit dem TLR-Signalweg verbundener Gene zu reduzieren (P<0,01). Auf Proteinebene reduzierte die SDJD signifikant den Anteil von TLR3 produzierenden epithelialen Atemwegszellen (P<0,05), und reduzierte signifikant die Expression von TLR2, TLR3, TLR4, TRIF, TRAF6, IKKalpha, NF-alpha in den epithelialen Zellen sowie die Konzentrationen der proinflammatorischen Zytokine IL-1beta und TNF-alpha im Lungengewebe (P<0,01). Fazit: Die SDJD kann den TLR-Signalweg und seine nachgeschalteten Reaktionen in den epithelialen Atemwegszellen hemmen, was einer der Mechanismen sein kann, durch die sie die virale Lungenentzündung lindert.

Kapsel zur Entgiftung von Winddispers; Influenzavirus H1N1; epitheliale Atemwegszellen; Toll-ähnlicher Rezeptor-Signalweg