Untersuchung des anti-entzündlichen Mechanismus von Hyperin auf das LPS-induzierte Entzündungsmodell des Zebrafisches basierend auf dem TLR4/MyD88/NF-κB-Signalweg

LAN Qing ,  

WANG Anna ,  

ZHOU Feifei ,  

LIU Keqian ,  

LI Zhao ,  

YU Wenjing ,  

TANG Shuyao ,  

LI Ping ,  

CHENG Shaowu ,  

DENG Sisi ,  

SONG Zhenyan ,  

摘要

Das Ziel dieser Studie war es, die Wirkung von Flavonoid-Verbindungen Hyperin (Hyp) auf das durch Lipopolysaccharide (LPS) induzierte Entzündungsmodell des Zebrafisches zu untersuchen und ihre potenziellen Mechanismen zu erforschen. Die Zebrafischlarven-Entzündungsmodelle wurden durch Mikroinjektion von 0,5 g·L-1 LPS oder Einweichen in 1 g·L-1 LPS hergestellt und anschließend mit verschiedenen Konzentrationen von Hyp (25, 50, 100 mg·L-1) für eine kontinuierliche 4-tägige Einweichbehandlung versehen. Die Entzündungsphänotypen wurden anhand von Sterblichkeitsrate, Missbildungsrate, Körperlänge und Dotterbeuteloberfläche bewertet. Verhaltensuntersuchungen wurden durchgeführt, um die Entzündungsstressreaktion der Larven zu bewerten. Die Wanderung von Makrophagen wurde unter einem Fluoreszenzmikroskop beobachtet. Die Expression von entzündungsbezogenen Genen Interleukin-1β (IL-1β), Interleukin-6 (IL-6), Makrophagen-Chemoattraktant-Protein-C-C-Motiv-Ligand-2 (CCL2), Chemoattraktant-Protein-C-X3-C-Motiv-Rezeptor-1 (CX3CR1), Chemoattraktant-Protein-C-C-Motiv-Rezeptor-2 (CCR2) und Toll-ähnlicher Rezeptor 4 (TLR4)/Myeloid differentiation factor 88 (MyD88)/Nuklearkolbatomfaktor-κB (NF-κB)-Signalweg wurden mittels Real-time-PCR analysiert. Verglichen mit der reinen Wasserspritzgruppe wiesen die Zebrafischlarven im Modellbereich eine signifikante Erhöhung der Sterblichkeitsrate, Missbildungsrate und Dotterbeuteloberfläche (P0.01) sowie eine signifikante Abnahme der Körperlänge (P0.01) auf. Die Gesamtwanderstrecke und die Zeit für schnelles Schwimmen nahmen signifikant zu (P0.01). Die mRNA-Expression von TLR4, MyD88, NF-κB, IL-1β, IL-6, CCL2, CX3CR1, CCR2 stieg signifikant an (P0.01). Im Vergleich zur Modellgruppe zeigten die Hypo-, Mittel- und Hochdosis-Gruppen sowie die Aspirin-Gruppe eine signifikante Abnahme der Sterblichkeitsrate, Missbildungsrate (P0.05, P0.01), eine signifikante Zunahme der Körperlänge (P0.05, P0.01), eine signifikante Abnahme des Dotterbeutelverhältnisses (P0.01) sowie eine signifikante Abnahme der Zeit für schnelles Schwimmen (P0.01). Die mRNA-Expression von TLR4, MyD88, NF-κB, IL-1β, IL-6, CCL2, CX3CR1, CCR2 nahm signifikant ab (P0.05, P0.01). Hyp kann den Entzündungsphänotyp des Zebrafisches verbessern und den Stress lindern, indem es möglicherweise den TLR4/MyD88/NF-κB-Signalweg reguliert.

关键词

Zebrafisch;Entzündung;Hyperin;Toll-ähnlicher Rezeptor 4;Myeloid differentiation factor 88;Nuklearkolbatomfaktor-κB

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