Ziel ist es, die Wirkung und den Mechanismus der Yanghe-Suppe (YHT) bei der Behandlung von Osteoarthritis (OA) zu untersuchen. Methoden In-vivo-Experiment: Nach einer einwöchigen adaptiven Fütterung wurden 30 C57BL/6J-Mäuse zufällig in eine normale Gruppe, eine Modellgruppe, eine niedrige und eine hohe Dosis YHT-Gruppe (8,3, 16,6 g · kg - 1), eine Celecoxib-Gruppe (18 mg · kg - 1) aufgeteilt jede Gruppe. Mit Ausnahme der normalen Gruppe konstruierten die anderen Gruppen ein OA-Modell durch eine Operation zur Zerstörung des lateralen Meniskus auf der rechten Seite. Nach erfolgreicher Modellerstellung erhielten die normalen und Modellgruppen täglich normale physiologische Kochsalzlösung oral, und die Behandlungsgruppen erhielten entsprechend der Dosis 4 Wochen lang das entsprechende Medikament. Verwendete Mikro-CT-Technologie zur Untersuchung des rechten Kniegelenks der Mäuse; Beobachtete die pathologische Morphologie der Synovialmembran und des Knorpels der Mäuse durch Färbung mit Alcianblau (ABH) und Hämatoxylin-Eosin (HE); Mit ELISA wurde der Gehalt an Interleukin-6 (IL-6), Tumornekrosefaktor-α (TNF-α) und anderen Entzündungsfaktoren im Serum von mit YHT behandelten Mäusen gemessen; Die Expression von Proteinen des PI3K / Akt / NF- κ B (PI3K / Akt / NF- κ B) -Signalwegs wurde mittels Immunhistochemie beobachtet. In-vitro-Experiment: RAW264.7-Zellen wurden mit Lipopolysacchariden (LPS) induziert, um ein M1-Entzündungsmodell zu etablieren, und es wurden 1%, 3%, 5% YHT zur Intervention hinzugefügt. Das Überstandfluid dieser Zellen (CM) wurde gesammelt und zu Chondrozytenkultivierungsmedium zur Intervention hinzugefügt. Verwendete die Hochleistungsflüssigchromatographie zur Analyse der Zusammensetzung von YHT; Verwendete den CCK-8-Test, um den Einfluss von YHT auf die Zellviabilität zu untersuchen; Mit Immunfluoreszenz, Durchflusszytometrie wurde der Polarisierungsgrad der M1 / M2-Makrophagenzellen untersucht; Mit dem Annexin V-Zelltod-Assay-Kit wurde der Apoptosegrad der Chondrozyten untersucht; Echtzeit-PCR und Western-Blot wurden zur Bestimmung der Expression von verwandten mRNA und Proteinen in RAW264.7 und Chondrozyten verwendet. Im Vergleich zur normalen Gruppe nahmen die mit dem OA-Modell behandelten Mausgruppen, wie das Knochen-Volumen / Gesamtgewebevolumen (BV / TV), die Anzahl der Knochenbälkchen (Tb.N) und die Dicke der Knochenbälkchen (Tb.Th), signifikant ab (P <0,01), und der Abstand zwischen den Knochenbälkchen (Tb.Sp) stieg signifikant an (P <0,01), die pathologischen Veränderungen der Synovialmembran und des Knorpels waren signifikant, die IL-6- und TNF-α-Spiegel im Serum stiegen signifikant an (P <0,01), die Vitalität der Chondrozyten nahm signifikant ab, während die Apoptoserate signifikant anstieg (P <0,01), die mittlere Fluoreszenzintensität von CD86 in RAW264.7-Zellen stieg signifikant an (P <0,01). Die Ergebnisse von Echtzeit-PCR zeigten, dass die mRNA-Spiegel von induzierbarer Stickoxid-Synthase (iNOS), IL-6, IL-1β in RAW264.7 und Chondrozyten signifikant stiegen (P <0,05, P <0,01), und die mRNA-Spiegel von Arginase-1 (Arg-1), IL-10, CD206 signifikant abnahmen (P <0,01). Western-Blot-Detektion zeigte, dass die Phosphorylierungsebene der Proteine von PI3K, Akt, NF-κB in der LPS-Gruppe signifikant stieg (P <0,01), die Expression der Metalloprotease-13 (MMP-13) stieg an, und die Expression des Kollagens Typ II (Col-2) verringerte (P <0,05, P <0,01). Im Vergleich zur Modellgruppe verbesserten alle YHT-Dosierungsgruppen signifikant die knochenbezogenen Parameter der Mäuse (P <0,01), reduzierten signifikant die Dicke der Synovialzellen und den Verschleiß auf der Knorpeloberfläche, linderten signifikant die IL-6- und TNF-α-Spiegel im Serum (P <0,01), erhöhten die Überlebensrate der Chondrozyten signifikant und reduzierten signifikant die Apoptose der Chondrozyten (P <0,01), und reduzierten signifikant die Polarisation der M1-Makrophagenzellen von RAW264.7 (P <0,01). Die Ergebnisse von Echtzeit-PCR zeigten, dass die mRNA-Spiegel von iNOS, IL-6, IL-1β in RAW264.7 und Chondrozyten signifikant abnahmen (P <0,05, P <0,01) und die mRNA-Spiegel von Arg-1, IL-10, CD206 signifikant stiegen (P <0,05, P <0,01). Western-Blot-Detektion zeigte, dass alle YHT-Dosierungsgruppen die Phosphorylierungsebene der Proteine von PI3K, Akt, NF-κB signifikant senkten (P <0,05, P <0,01), und gleichzeitig die Expression von MMP-13 unterdrückten und die Expression von Col-2-Proteinen erhöhten (P <0,05, P <0,01). Fazit YHT kann die durch die Entzündung der Synovialmakrophagen verursachte Osteoarthritis signifikant verbessern. Sein Weg hängt wahrscheinlich mit der Hemmung des PI3K / Akt / NF-κB-Signalwegs zusammen.

Yanghe-Suppe; Osteoarthritis; Makrophagen; Chondrozyten; Mechanismusforschung