Effect of lncRNA MANCR on Proliferation, Migration, and Epithelial Mesenchymal Transition of Gastric Cancer Cells by Regulating miR-150-5p/GPNMB Axis

LI Chao ,  

WANG Shihui ,  

LIN Jie ,  

WANG Fanke ,  

ZHANG Rui ,  

摘要

Ziel dieser Studie war es, die Auswirkungen von dem mitosebezogenen langen nicht-kodierenden RNA (lncRNA MANCR) auf die Proliferation, Migration und epithelial-mesenchymalen Transition (EMT) von Magenkrebszellen (GC) zu untersuchen, die durch die Mikro-RNA-50-5p (miR-150-5p) / Nicht-metastasierende Melanin-Protein-B (GPNMB) Achse reguliert werden. Methoden Die Expression von lncRNA MANCR, miR-150-5p und GPNMB wurde in GC-Geweben und angrenzenden Krebsgeweben, die zwischen Juni 2022 und September 2023 am Ersten Krankenhaus der Medizinischen Universität Hebei operativ entfernt wurden, mittels Echtzeit-PCR gemessen. Wir haben auch die Expression von lncRNA MANCR in humanen Magenschleimhautepithelzellen GES-1 und humanen Magenkrebszellen BGC-823 in vitro kultiviert gemessen. BGC-823-Zellen wurden zufällig in vier Gruppen aufgeteilt: Kontrollgruppe (normale Kultur), sh-NC-Gruppe (transfiziert mit sh-NC), sh-MANCR-Gruppe (transfiziert mit sh-MANCR), Co-transfizierte sh-MANCR+anti-NC-Gruppe (co-transfiziert mit sh-MANCR und anti-NC) und Co-transfizierte sh-MANCR+anti-miR-150-5p-Gruppe (co-transfiziert mit sh-MANCR und anti-miR-150-5p) ; Wir analysierten die Expression von lncRNA MANCR, miR-150-5p und GPNMB in den BGC-823-Zellen jeder Gruppe ; Ein EdU-Färbetest wurde durchgeführt, um die Proliferation der BGC-823-Zellen zu messen ; Das Transwell-Experiment wurde zur Messung der Invasion und Migration von Zellen verwendet ; Die Methoden des Western Blot wurden verwendet, um die Expression von EMT-bezogenen Proteinen, einschließlich E-Cadherin, N-Cadherin, Vimentin und GPNMB-Proteinen, zu messen ; schließlich wurde die Wechselwirkung zwischen lncRNA MANCR und miR-150-5p sowie zwischen miR-150-5p und GPNMB durch einen Luciferase-Reporter-Test analysiert. Ergebnisse Im Vergleich zu den angrenzenden Krebsgeweben stieg die Expression von lncRNA MANCR und GPNMB in GC-Geweben signifikant an, während die Expression von miR-150-5p signifikant abnahm (P <0,05). Im Vergleich zu humanen Magenschleimhautepithelzellen GES-1 stieg die Expression von lncRNA MANCR in den BGC-823-Zellen signifikant an (P <0,05). Im Vergleich zu den Kontroll- und sh-NC-Gruppen nahmen die Anzahl der EdU-positiven Zellen, die Migrationszellen, die Invasionszellen, lncRNA MANCR, GPNMB-RNA und -Proteine, N-Cadherin- und Vimentin-Proteine signifikant ab, während die miR-150-5p und E-Cadherin-Proteine signifikant zugenommen haben in der sh-MANCR-Gruppe (P <0,05) ; Im Vergleich zu den Gruppen sh-MANCR und sh-MANCR+anti-NC nahmen im sh-MANCR+anti-miR-150-5p-Gruppe die Expression von miR-150-5p und E-Cadherin-Proteinen signifikant ab, während die Anzahl der EdU-positiven Zellen, die Migrations- und Invasionszellen, die GPNMB-RNA und -Proteine, die N-Cadherin- und Vimentin-Proteine signifikant zugenommen haben (P <0,05). lncRNA MANCR kann negativ auf miR-150-5p regulieren, und miR-150-5p kann negativ auf GPNMB regulieren. Fazit Das Schweigen von lncRNA MANCR kann die Migration, Proliferation und EMT von GC-Zellen durch Regulierung der Achse miR-150-5p / GPNMB hemmen.

关键词

mitotically-associated long non-coding RNA;microRNA-50-5p;non-metastatic melanoprotein B;gastric cancer;proliferation;migration;epithelial mesenchymal transition

阅读全文