Mechanism of Yitangkang Prescription in Improving Metabolic-inflammatory Imbalance in Diabetic Kidney Disease by Cross-organ Regulation of Mast Cell Network
Ziel ist es, den Wirkungsmechanismus der chinesischen Medizin Yitangkang zur Verbesserung der diabetischen Nierenerkrankung (DKD) durch Regulation der Degranulation der vergrößerten Mastzellen (MC) zu untersuchen. Es wurden 16 Wochen alte db/db Mäuse (DKD-Modell, n=45) als Experimentalgruppe und db/m Mäuse (n=9) als Normalgruppe ausgewählt. Mit der Methode der Zufallszahltabelle wurde die Experimentalgruppe in eine Modellgruppe, eine niedrige, mittlere und hohe Dosisgruppe von Yitangkang (14.463, 28.925, 57.850 g·kg-1·d-1) und eine Phenylalaningruppe (2,6 mg·kg-1·d-1) aufgeteilt. Nach 8 Wochen interventionellem Gavagen wurden folgende Methoden zur Bewertung verwendet: Flüssigkeitschromatographie-Tandem-Massenspektrometrie (LC-MS/MS) zur Identifizierung wichtiger wirksamer Bestandteile von Yitangkang; Hämatoxylin-Eosin-Färbung (HE) zur Beobachtung morphologischer Veränderungen in Milz- und Nierengewebe von Mäusen; Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) zur Bestimmung der Serumspiegel der entzündlichen Faktoren Interleukin-1β (IL-1β), Interleukin-6 (IL-6), Tumor-Nekrose-Faktor-α (TNF-α) und der Gewebespiegel von 5-Hydroxytryptamin (5-HT) und Histamin (HIS); In-situ-Terminal-Markierungstechnik (TUNEL) zur Beobachtung der Zellapoptose in den Nieren; Immunhistochemie (IHC) zur Analyse der durchschnittlichen optischen Dichte von Nephritin, Podocin, Caveolin-1 und NLRP3 in den Nierengeweben; und ungerichtete metabolomische Analyse zur Untersuchung der Veränderung von Metaboliten in den Nieren. Toluidinblau-Färbung (TB) zur Bewertung der Infiltration und Degranulation von MC in Herz, Skelettmuskulatur, Leber, Dünndarm und Nierengewebe. Ergebnisse LC-MS/MS identifizierte 15 wichtige wirksame Bestandteile von Yitangkang; HE-Färbung bestätigte, dass Yitangkang die Struktur des Milz- und Nierengewebes der Mäuse verbesserte und Entzündungen linderte; TB-Färbung bestätigte, dass Yitangkang die Infiltration und Degranulation von MC in verschiedenen Geweben signifikant reduzierte. Yitangkang reduzierte signifikant die Serumspiegel von IL-1β, IL-6, TNF-α sowie die Gewebespiegel von 5-HT und HIS in verschiedenen Geweben (P<0,01), und verbesserte Entzündungen und MC-Degranulation. TUNEL-Färbung zeigte, dass Yitangkang die Nierenzellapoptose reduzierte; IHC zeigte, dass Yitangkang die Expression von Nephritin, Podocin erhöhte und die Expression von Caveolin-1, NLRP3 (P<0,01) verringerte; Die ungerichtete metabolomische Analyse selektierte verschiedene signifikant modifizierte Metaboliten, und die Hauptwirkmechanismen betreffen den Tryptophan-, Histidin-, Arachidonsäurestoffwechsel und die Wechselwirkung zwischen neuroaktiven Liganden und Rezeptoren, unter anderem. Fazit Yitangkang verbessert das metabolisch-entzündliche Ungleichgewicht von DKD und lindert die Schädigung der glomerulären Mikrogefäßbarriere der Niere durch die Regulierung des MC-Netzwerks zwischen Organen.