Ziel: Basierend auf dem multifunktionalen Transkriptionsfaktor-Weg CDK16/MYC wird der molekulare Mechanismus untersucht, durch den das Serum mit Gegen Qinlian-Suppe die Glykolyse hemmt und die Chemotherapie-Sensitivität von 5-Fluorouracil (5-FU)-resistenten kolorektalen Krebszellen (CRC) fördert. Methoden: Unter Intervention mit Serum, das Gegen Qinlian-Suppe in Konzentrationen von 5 %, 10 %, 20 % und 30 % enthält, wurde die CCK-8-Methode verwendet, um die Wirkung der Suppe auf die 5-FU-Sensitivität menschlicher Kolonkarzinomzellen HCT-116/5-FU zu messen und experimentelle Konzentrationen für 5-FU und die Suppe festzulegen; Edu-Färbung und doppelte Annexin V-FITC/PI-Färbung wurden eingesetzt, um proliferative und apoptotische Veränderungen in HCT-116/5-FU-Zellen bei Einzel- und Kombinationsbehandlungen mit 5-FU beziehungsweise Suppe zu detektieren; Glukoseverbrauch, ATP- und Milchsäureproduktion wurden kolorimetrisch bestimmt; Western Blot analysierte glykolysebezogene Proteine, CDK16, MYC und deren Phosphorylierung. Mit Co-Immunpräzipitation (Co-IP) wurde die Proteininteraktion zwischen CDK16 und MYC untersucht, eine Cycloheximid (CHX)-Behandlung prüfte den Einfluss von CDK16-Überexpression auf die Stabilität des MYC-Proteins. Ergebnisse: Im Vergleich zur Kontrollgruppe wurde die Zellvitalität von HCT-116 Zellen bei Zugabe von 2,5 mg·L^-1 5-FU signifikant gehemmt, wobei die Hemmung mit steigender 5-FU-Konzentration zunahm; HCT-116/5-FU-Zellen zeigten eine deutliche Hemmung erst bei 5 mg·L^-1 5-FU (P < 0,05), diese Konzentration wurde für das Modell gewählt. Im Vergleich zur 5-FU-Gruppe wurde die Zellvitalität von HCT-116/5-FU durch die Zugabe von 5 % Serum mit Gegen Qinlian signifikant gehemmt (P < 0,05), und die Hemmung nahm mit steigender Serumkonzentration zu, daher wurde 5 % verwendet. Im Vergleich zur Kontrollgruppe reduzierten sich die Zellproliferation in den Gruppen 5-FU, Gegen Qinlian und 5-FU + Gegen Qinlian signifikant (P < 0,05), und der Apoptosegrad stieg deutlich an (P < 0,01); die Hemmung der Zellproliferation sowie der Glukoseverbrauch und die Produktion von ATP und Laktat waren in der Gruppe 5-FU + Gegen Qinlian am stärksten (P < 0,01). Weiterhin zeigte die Gruppe 5-FU + Gegen Qinlian im Vergleich zu Kontroll-, 5-FU- und Gegen Qinlian-Gruppen eine stärkere Hemmung von MYC und seiner Phosphorylierung (P < 0,01) sowie eine signifikante Hemmung der glykolytischen Enzyme HK2, PDK1, LDHA und PKM2 (P < 0,01). Im Vergleich zur 5-FU-Gruppe war die Expression von CDK16 in der 5-FU + Gegen Qinlian-Gruppe herunterreguliert (P < 0,01), außerdem waren die MYC- und phosphorylierten Proteinspiegel deutlich reduziert (P < 0,01). Außerdem war die Stabilität des MYC-Proteins über die Zeit in der 5-FU + Gegen Qinlian-Gruppe im Vergleich zur 5-FU-Gruppe signifikant verringert (P < 0,05), wurde jedoch durch CDK16-Überexpression gerettet (P < 0,05). Schlussfolgerung: Die Gegen Qinlian-Suppe kann die Sensitivität von HCT-116/5-FU-Zellen gegenüber 5-FU deutlich erhöhen, möglicherweise durch Inhibition von CDK16 und damit verminderte MYC-vermittelte Glykolyse.

Kolorektales Karzinom; 5-Fluorouracil (5-FU)-Resistenz; MYC; Glykolyse; cyclinabhängige Kinase 16 (CDK16)