Mechanismus der Regulation von exosomalem miR-328 und STAT3/c-Fos/NFATc1-Weg durch die Lung Yanning-Formel zur Hemmung der Invasion und Metastasierung von Lungenkrebszellen

JI Junqing ,  

ZHANG Chengcheng ,  

XU Zhenye ,  

WANG Zhongqi ,  

摘要

Ziel ist die Erforschung des molekularen Wirkmechanismus der Lung Yanning-Formel bei der Regulation von exosomalem miR-328 und dessen Einfluss auf Invasion und Metastasierung von Lungenkrebs. Methoden: Modelle beinhalteten niedrige und hohe Metastasierungszelllinien 95C und 95D von Lungenkrebs sowie isolierte Exosomen. Zunächst wurden die 95C- und 95D-Zellen in vitro kultiviert, das Überstandmedium zur Exosomenisolierung gesammelt und die Exosomen mittels Transmissionselektronenmikroskopie (TEM), Nanopartikel-Tracking-Analyse (NTA) und Western blot charakterisiert; Exosomen-Aufnahmetests bestätigten, dass 95C- und 95D-Zellen Exosomen aus dem Plasma von Lungenkrebspatienten aufnehmen können. Zellproliferations- und Aktivitätstests (CCK-8) bewerteten die hemmende Wirkung der Lung Yanning-Formel (0, 0,1, 0,2, 0,4, 0,8, 1,6, 3,2, 6,4 g·L-1) auf die Proliferation von 95C- und 95D-Zellen. Basierend auf den Ergebnissen wurden Gruppen für weitere Experimente gebildet: Kontrollgruppe und zwei Gruppen mit Lung Yanning-Behandlung (1 und 2 g·L-1). Wundheilungs- und Transwell-Tests bestimmten die hemmende Wirkung der Lung Yanning-Formel auf Migration und Invasion der 95C- und 95D-Zellen in vitro; Western blot überwachte die Expression der Proteine Januskinase 2 (JAK2), Signaltransduktions- und Transkriptionsaktivator 3 (STAT3), Protoonkogen Fos (c-Fos) und aktivierter T-Zell-Nuklearfaktor 1 (NFATc1); die Expression von miR-328 mRNA wurde mittels Echtzeit-PCR gemessen. Ergebnisse: Exosomen aus dem Plasma von Lungenkrebspatienten konnten die Migration, Invasion und miR-328-Expression in 95C- und 95D-Zellen erhöhen (P<0,05, P<0,01); die Lung Yanning-Formel hemmte dosisabhängig die Proliferation und Invasion von 95C- und 95D-Zellen (P<0,01), mit stärkerer Wirkung auf 95C. Die Formel reduzierte zudem exosomales miR-328 und hemmte die Proteinexpression von JAK2, STAT3 sowie deren nachgeschalteten Zielgenen c-Fos und NFATc1 (P<0,01). Schlussfolgerung: Die Lung Yanning-Formel könnte die Metastasierung von Lungenkrebszellen durch Herunterregulierung von exosomalem miR-328 hemmen, wahrscheinlich über den STAT3/c-Fos/NFATc1-Signalweg. Weitere Forschungen sind erforderlich, um den Mechanismus zu klären und klinisch anzuwenden, was neue therapeutische Ansätze mit traditioneller chinesischer Medizin für die Behandlung von Lungenkrebs bieten könnte.

关键词

Lung Yanning-Formel; Exosomen; miR-328; Lungenkrebs; Invasion und Metastasierung

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