Ziel dieser Studie ist es, die Regulation des Succinatstoffwechsels zu erforschen, die Succinylierungsmodifikation und die Hemmung von Leberkrebszellen durch die Formel XYXT (XYXT) und ihren Wirkmechanismus. Methode: Zubereitung des medizinischen XYXT-Serums; Verwendung des Zellproliferationstests (CCK-8) zur Beobachtung des Effekts verschiedener Konzentrationen von Succinat auf die Proliferation von HepG2-, MHCC97H-Zellen und Bestimmung der Konzentration zukünftiger Experimente; Verwendung von CCK-8, um den Effekt des medizinischen XYXT-Serums (5%, 10%, 15%) auf die Proliferation von HepG2-, MHCC97H-Zellen zu detektieren; Durchflusszytometrie, Zellschabetest und Transwell-Test zur Detektion des Effekts von 10% medizinischem XYXT-Serum auf den Zellzyklus, die Migration, Invasion und Apoptose von HepG2-, MHCC97H-Zellen; Änderungen im Succinatstoffwechsel und der Succinylierungsmodifikation werden durch die Bestimmung von Succinat, die Messung der Succinat-Dehydrogenase-Aktivität (SDH) und das Western-Blotting detektiert; die Expression von Yes-associated protein 1 (YAP1) und silent information regulator factor 5 (SIRT5) wird durch Echtzeit-PCR, Western-Blot detektiert; die Bindung der Hauptkomponenten von XYXT an die Zielproteine wird durch molekulares Docking überprüft. Im Vergleich zur Kontrollgruppe kann 1~2 mmol·L-1 Succinat die Proliferation von HepG2-, MHCC97H-Zellen signifikant fördern (P<0.01); im Vergleich zur Kontrollgruppe hemmt das medizinische XYXT-Serum (5%, 10%, 15%) signifikant die Proliferation von HepG2-, MHCC97H-Zellen (P<0.05, P<0.01); im Vergleich zur Kontrollgruppe kann 10% medizinisches XYXT-Serum den Zellzyklus von HepG2-, MHCC97H-Zellen in der Prä-DNA-Phase (G0/G1) (P<0.01) blockieren, und hemmt signifikant die Migration (P<0.01) und Invasion (P<0.05, P<0.01) von HepG2-, MHCC97H-Zellen, fördert die Apoptose von HepG2-, MHCC97H-Zellen (P<0.01); zusätzlich, im Vergleich zu XYXT allein, steigt die Proliferationsrate von HepG2-, MHCC97H-Zellen (P<0.05, P<0.01), Migration und Invasion (P<0.05, P<0.01) signifikant an, der Prozentsatz der Zellen in der G0/G1-Phase nimmt ab (P<0.01), die Apoptoserate der Zellen nimmt ebenfalls ab (P<0.01). In Bezug auf den Succinatstoffwechsel, im Vergleich zur Kontrollgruppe reduziert das medizinische XYXT-Serum (10%) den Succinatgehalt von HepG2-, MHCC97H-Zellen (P<0.05, P<0.01), erhöht die SDH-Aktivität (P<0.01) und reguliert den Succinylierungsgrad signifikant. In Bezug auf die Regulierung des YAP1/SIRT5-Weges reduziert das medizinische XYXT-Serum (10%) im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant die Expression von YAP1 von der mRNA und das Protein in HepG2-, MHCC97H-Zellen (P<0.05, P<0.01) und erhöht signifikant die Expression von SIRT5-mRNA und Protein (P<0.05, P<0.01). Die Ergebnisse des molekularen Dockings zeigen, dass YAP1 und SIRT5 sowie die Hauptwirkstoffe von XYXT eine gute Bindungsfähigkeit mit den Zielproteinen YAP1 und SIRT5 haben. Fazit: XYXT reguliert den Succinatstoffwechsel, die Succinylierungsmodifikation und die Hemmung von Leberkrebszellen, indem es in den YAP1/SIRT5-Signalweg eingreift.

Leberkrebs;XYXT;Succinat;Succinylierung;Yes-associated protein 1 (YAP1);Silent information regulator factor 5 (SIRT5)