Ganlu Xudoudan治疗病毒性肺炎的潜在成分及作用机制

ZHANG Weichao ,  

LI Yayun ,  

GAO Tianci ,  

HOU Mengxing ,  

XU Wenzhong ,  

CHEN Fenqiao ,  

摘要

Ziel ist es, die Netzwerkpharmakologie und die molekulare Docking-Technologie in Kombination mit der in vivo-Experimentvalidierung zu nutzen, um den Wirkmechanismus von Ganlu Xudoudan bei der Behandlung von viraler Lungenentzündung zu erforschen. Die Methoden prognostizieren die Hauptbestandteile, Zielgene und Hauptwege von Ganlu Xudoudan durch die Netzwerkpharmakologie und das molekulare Docking, und verwenden dann das molekulare Docking, um die Hauptbestandteile mit den Schlüsselpunkten zu validieren. Sechzig männliche C57BL/6-Mäuse werden zufällig ausgewählt und in weiße, Modell-, Dexamethason-, niedrige, mittlere und hohe Dosen von Ganlu Xudoudan (je 10 pro Gruppe) aufgeteilt. Die Kontrollgruppe und die Modellgruppe erhalten einmal täglich eine Magenspülung mit physiologischer Kochsalzlösung (10 mL·kg-1), die Dexamethason-Gruppe erhält eine intraperitoneale Injektion von 5 mg·kg-1 Dexamethason, die Gruppen mit niedrigen, mittleren und hohen Dosen von Ganlu Xudoudan werden oral mit einer Lösung von 1,3, 2,6 und 3,9 g·kg-1 Konzentration verabreicht, alle 12 Stunden. Durch Messung des Verhältnisses von feucht/trocken Masse des Lungenparenchyms (W/D), durch Hämatoxylin-Eosin-Färbung (HE), Beobachtung der histologischen Veränderungen im Lungenparenchym der Maus, durch die enzymbasierte Immunoassay-Methode (ELISA) zur Messung der Expression von Entzündungsfaktoren wie Tumornekrosefaktor-α (TNF-α), Interleukin (IL)-17 und IL-1β im bronchoalveolären Lavagefluid (BALF), durch die Protein-Immunblotting-Methode (Western Blot) zur Messung der Expression von Proteinen der Phosphoinositol 3-Kinase (PI3K) und der Proteinkinase (Akt) im Lungenparenchym, um die Ergebnisse zu validieren. Die Ergebnisse dieser Studie identifizieren 12 potenziell aktive Bestandteile in Ganlu Xudoudan durch die Netzwerkpharmakologie, 306 Gemeinsamkeiten zwischen Ganlu Xudoudan und viraler Lungenentzündung, es werden 20 Schlüsselpunkte durch die Analyse des Protein-Protein-Wechselwirkungsnetzwerks (PPI) erhalten, und die 20 Hauptsignalwege werden durch die Analyse der Gen-Ontologie- (GO) und der Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG)-Reichenrichung erhalten, wodurch ein Netzwerk aktive Bestandteile-Gemeinsamkeiten-Signalwege aufgebaut wird. Die Validierung des molekularen Dockings zeigt, dass die Hauptbestandteile von Ganlu Xudoudan eine starke Affinität zu den Schlüsselrezeptoren der viralen Lungenentzündung haben. Die Ergebnisse der Tierversuche zeigen, dass im Vergleich zur Kontrollgruppe die Struktur des Bronchialepithels und die Alveolarstrukturen des Lungenparenchyms bei Mäusen der Modellgruppe schwer beschädigt sind, es gibt eine massive Infiltration entzündlicher Zellen, Alveolen werden vergrößert, und es gibt ein signifikantes interstitielles Ödem. W/D, die Spiegel der entzündlichen Zytokine IL-1β, TNF-α, IL-17 im BALT steigen signifikant an, und die Spiegel der Expression von Proteinen p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt im Lungenparenchym steigen signifikant an (P<0,05). Im Vergleich zur Modellgruppe werden Lungenverletzungen bei Mäusen der verschiedenen Dosierungsgruppen von Ganlu Xudoudan und in der Dexamethason-Gruppe gemildert, W/D, die Spiegel von TNF-α sinken signifikant ab (P<0,05) in den niedrigen und hohen Dosierungsgruppen von Ganlu Xudoudan; die Spiegel von IL-1β und IL-17 sinken signifikant in den mittleren und hohen Dosierungsgruppen von Ganlu Xudoudan und in der Dexamethason-Gruppe, die Spiegel der Expression von Proteinen p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt im Lungenparenchym sinken signifikant (P<0,05). Schlussfolgerung Ganlu Xudoudan kann Lungenverletzungen bei Mäusen mit viralen Lungenentzündungen verbessern, indem es die entzündliche Reaktion hemmt, und der Wirkmechanismus kann mit der Hemmung der Aktivierung des PI3K/Akt-Signalwegs zusammenhängen.

关键词

网络药理学;分子对接;Ganlu Xudoudan;病毒性肺炎;磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路

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