Ziel ist es zu untersuchen, ob die DTT-Suppe (Diti Tang) die lipidale Ablagerung in Hepatozyten, die durch Ölsäure (OA) induziert wird, durch Regulation des Apoptose-Protease-Aktivierungsfaktors 1 (Apaf1), der die mitochondriale Übergangspermeabilität (MPT) wahrnimmt, vermittelt über Apoptose/Pyroptose verbessert. Methode: Humane Hepatozellkarzinomzellen (HepG2) wurden mit 800 μmol/L OA induziert, um ein Modell zur lipidalen Ablagerung in Hepatozyten zu erstellen. Optimale Interventionsbedingungen mit DTT-haltigem Serum und Apaf1-Inhibitor ZYZ488 wurden durch Zellproliferations- und Vitalitätsmessung (CCK-8) ermittelt. Die HepG2-Zellen wurden in Kontrollgruppe, OA-Gruppe (800 μmol/L), OA (800 μmol/L) + Kontrollserum (SC) (10%), OA (800 μmol/L) + DTT (10%), OA (800 μmol/L) + ZYZ488 (1 μmol/L) aufgeteilt. Veränderungen der lipiden Ablagerung in Hepatozyten wurden durch Oil Red O-Färbung, Triglyzerid (TG) und freie nichtveresterte Fettsäure (NEFA) Bestimmung bewertet; die Öffnung des mitochondrialen Permeabilitätstransitionsporus (MPTP) und Änderungen des mitochondrialen Membranpotenzials wurden mittels fluoreszierender Färbung mit Calcein AM und JC-1 detektiert; Apoptose- und Pyroptose-Zellzahl durch Durchflusszytometrie bestimmt; Apaf1-, GSDME-, PARP1-, Caspase-3-, Caspase-4- und Caspase-9-mRNA-Expressionsniveaus mittels Echtzeit-PCR gemessen; Apaf1-Expression durch Immunfluoreszenz untersucht; Proteinexpression von Apaf1, GSDME, PARP1, Caspase-3, Caspase-4, Caspase-9, geschnittenem Caspase-3 und geschnittenem Caspase-9 mittels Western Blot analysiert. Ergebnisse: DTT-haltiges Serum reduzierte signifikant die durch OA induzierten TG- und NEFA-Spiegel in HepG2-Zellen (P<0,01) und verbesserte effektiv die Akkumulation von Lipidtröpfchen in Hepatozyten. DTT-Serum hemmte die übermäßige Öffnung von MPTP und den Abfall des mitochondrialen Membranpotenzials (P<0,01). Außerdem senkte es deutlich die Expression von Schlüsselproteinen und mRNA in den durch Apaf1 vermittelten Apoptose-(Caspase-9/Caspase-3/PARP1) und Pyroptose-(Caspase-4/Caspase-3/GSDME)-Signalwegen (P<0,05), mit ähnlicher Wirkung wie ZYZ488. Fazit: Die DTT-Suppe verbessert die lipidale Ablagerung in Hepatozyten durch Hemmung der Apoptose- und Pyroptosewege, die durch Apaf1 und MPT vermittelt werden.

lipidale Ablagerung in Hepatozyten;Diti Tang-Suppe;Apoptose-Protease-Aktivierungsfaktor 1 (Apaf1);mitochondrialer Permeabilitätsübergangsporenkomplex (MPT);Apoptose;Pyroptose