Kombination von Bu Zhong Yi Qi Tang und Cisplatin reguliert den PDK1/Akt-Signalweg und hemmt die Glykolyse sowie die Proliferation von Lungenadenokarzinomzellen

LI He ,  

BAI Sijia ,  

LIU Wenjun ,  

WANG Jianguang ,  

LYU Jialu ,  

WANG Chun ,  

摘要

Ziel der Studie war es, die Wirkung der Kombination von Bu Zhong Yi Qi Tang mit Cisplatin auf die Regulation des Signalwegs der Pyruvat-Dehydrogenase-Kinase 1 (PDK1) / Proteinkinase B (Akt) und deren Einfluss auf die Glykolyse und Proliferation menschlicher Lungenadenokarzinomzellen (A549) zu untersuchen. Mithilfe der Transkriptom-Sequenzierung (RNA-seq) wurde der Genexpressionsunterschied glucosebezogener Gene zwischen A549-Zellen und cisplatinresistenten A549/DDP-Zellen verglichen; PDK1 wurde mittels siRNA herunterreguliert, die Effizienz mittels Western Blot und Echtzeit-PCR geprüft; Zellproliferation und Aktivität wurden mit der CCK-8-Methode unter verschiedenen Behandlungsgruppen gemessen; die 20%ige Hemmkonzentration (IC20) wurde ermittelt; Kolonie-Bildungsexperimente durchgeführt; Laktat und ATP gemessen; mitochondriale Membranpotenziale mit dem JC-1-Fluoreszenzsonden bestimmt; PDK1, p-Akt, Akt, PKM2, GLUT1, PDH, LDHA Proteinexpression durch Western Blot analysiert; PDK1 und p-Akt mittels konfokaler Immunfluoreszenz untersucht. Die Ergebnisse zeigten eine hohe PDK1-Expression in A549 und A549/DDP Zellen, effizientes Knockdown, verringerte Zellproliferation sowie Veränderungen im Stoffwechsel und mitochondrialen Potential nach Behandlung. Fazit: Die Kombination von Bu Zhong Yi Qi Tang und Cisplatin hemmt die Proliferation von Lungenadenokarzinomzellen durch Regulation des Glykolysewegs via PDK1/Akt-Signalweg.

关键词

Bu Zhong Yi Qi Tang; Cisplatin; Glykolyse; Pyruvat-Dehydrogenase-Kinase 1 (PDK1) / Proteinkinase B (Akt); kleine interferierende RNA (siRNA)

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