Die Rolle und der Mechanismus des Qiangjin-Tabletts bei der Regulation des Keap1/Nrf2-Signalwegs zur Verringerung der oxidativen Stressschädigung bei Varikozele

DONG Liang ,  

YANG Fang ,  

ZHANG Jingyi ,  

TANG Xinyi ,  

LI Yulin ,  

YU Xujun ,  

CHANG Degui ,  

摘要

Ziel war es, den Mechanismus zu untersuchen, durch den das Qiangjin-Tablet die Spermatogenese bei Varikozele (VC) über den Keap1/Nrf2-Signalweg verbessert, der durch oxidativen Stress vermittelt wird. Methoden: 10 SD-Ratten wurden zufällig in Kontroll- und Modellgruppen eingeteilt, die Stabilität des Modells wurde durch pathologische Untersuchungen bestätigt. 36 SD-Ratten wurden zufällig in sechs Gruppen eingeteilt: Kontrollgruppe, Modellgruppe, Qiangjin Niedrigdosisgruppe (0,23 g·kg^-1), Qiangjin Mittelgrosse Dosisgruppe (0,46 g·kg^-1), Qiangjin Hochdosisgruppe (0,92 g·kg^-1) und Maiziling-Gruppe (61,7 mg·kg^-1), mit jeweils 6 Tieren. Das experimentelle Modell der linken Varikozele (ELV) wurde durch teilweise Ligatur der linken Nierenvene bei Ratten hergestellt (Simulation des menschlichen Nussknacker-Syndroms), die Dosierungen wurden 28 Tage lang täglich per oraler Verabreichung kontinuierlich gegeben. Das in-vitro-Modell der Rattentestikel-Kultur wurde mit Transwell-Kammern etabliert, Intervention erfolgte mit Arznei-serum von Qiangjin (2,3, 4,6, 9,2 g·kg^-1). Unter dem Mikroskop wurde die Morphologie der linken Niere beobachtet, der Durchmesser der linken Samenvene (LSV) mit einem Mikrometer gemessen; wöchentliche Körpergewicht der Ratten wurde aufgezeichnet, Epididymis- und Hodengewichte wurden gewogen; pathologische Veränderungen des Hodengewebes wurden mittels Hämatoxylin-Eosin (HE) Färbung beurteilt; Testosteron und reaktive Sauerstoffspezies (ROS) in Zellkulturüberständen und Hodengewebe wurden mittels ELISA gemessen; ROS-Gehalt wurde durch Durchflusszytometrie analysiert; immunhistochemische Analyse von Keap1, Nrf2, 3β-Hydroxysteroiddehydrogenase (3β-Hsd), GATA-bindendes Protein-4 (Gata-4), Protoonkogen-Rezeptor-Tyrosinkinase (C-kit) durchgeführt; ultrastrukturelles Gewebe wurde durch Transmissionselektronenmikroskopie (TEM) untersucht; apoptotische Zellen wurden durch in situ Terminierungsmarkierung (TUNEL) nachgewiesen; die Expressionsanalyse von Keap1, Nrf2, Glutathion S-Transferase α2 (Gsta2), μ1 (Gstm1), Hämoxygenase-1 (HO-1), Chinonoxidoreduktase 1 (Nqo1), Thioredoxinreduktase 1 (Txnrd1) erfolgte mittels Echtzeit-PCR und Western Blot. Ergebnisse: Im Vergleich zur Kontrollgruppe wurde im Modellgruppe der ROS-Gehalt und der Anteil apoptotischer Zellen signifikant erhöht (P<0,01), die Testosteronkonzentration (T) deutlich reduziert (P<0,01), die mRNA- und Proteinexpression von Keap1 signifikant erhöht (P<0,01), und die mRNA- und Proteinexpression von Nrf2, Gsta2, Gstm1, HO-1, Nqo1 und Txnrd1 signifikant verringert (P<0,05). Im Vergleich zur Modellgruppe waren ROS-Gehalt und apoptosisanteil in den Qiangjin-Dosierungsgruppen signifikant verringert (P<0,05), die Keap1-mRNA- und Proteinexpression signifikant reduziert (P<0,05) und die mRNA- und Proteinexpression von Nrf2, Gsta2, Gstm1, HO-1, Nqo1 und Txnrd1 signifikant erhöht (P<0,05). Schlussfolgerung: Der Mechanismus, durch den das Qiangjin-Tablet die Spermatogenese bei VC verbessert, steht im Zusammenhang mit der Regulation des Keap1/Nrf2-Signalwegs und der Verringerung des oxidativen Stresses.

关键词

Varikozele; traditionelle chinesische Medizin; Schädigung durch oxidativen Stress; Kelch-ähnliches epoxidchlorpropan-assoziiertes Protein 1 (Keap1)/ nuklearer Faktor E2-verwandter Faktor 2 (Nrf2) Signalweg; in-vitro-Experimentmodell

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