Einfluss von Paeonia-Glycyrrhiza-Absud auf die Proliferation und Differenzierung neuraler Stammzellen bei Ratten im Zustand von Extremitätenspastik nach Schlaganfall
Ziel ist es, den Schweregrad der Muskeltonusverletzung bei Ratten im Zustand der Extremitätenspastik nach Schlaganfall sowie die Expression des Nestin-Proteins und β-Catenins im M1-Bereich des Kortex zu analysieren und den Wirkmechanismus von Paeonia-Glycyrrhiza-Absud in verschiedenen Dosierungen bei Ratten mit spastischem Zustand (SCA) nach Schlaganfall zu untersuchen. Methoden: Die Ratten wurden zufällig in Kontrollgruppe, Modellgruppe, positive Kontrollgruppe (Baclofen, 5,25 mg·kg-1) und Gruppen mit niedriger, mittlerer und hoher Dosierung von Paeonia-Glycyrrhiza-Absud (2,1, 4,2, 8,4 g·kg-1) eingeteilt, jeweils 9 Tiere pro Gruppe. Ein spastisches Modell nach Schlaganfall wurde mittels modifizierter Photostimulationsmethode kombiniert mit Injektion von wasserfreiem Ethanol in die innere Kapsel erstellt. Nach Bestätigung des Modellerfolgs durch Verhaltensbewertung wurde eine medikamentöse Intervention durchgeführt. Neurologisches Defizit und Muskeltonus wurden durch Verhaltensbewertung gemessen, Bewegungsdistanz im offenen Feld getestet, synaptische Strukturen mittels Transmissionselektronenmikroskopie untersucht, Veränderungen der Skelettmuskelfasern durch ATPase-Färbung analysiert, morphologische Gewebeveränderungen durch Hämatoxylin-Eosin (HE)-Färbung beobachtet, Immunhistochemie, Echtzeit-PCR und Western Blot zur Bestimmung von Nestin- und β-Catenin-mRNA- und Proteinexpression im M1-Kortex eingesetzt. Ergebnisse: Im Vergleich zur Kontrollgruppe zeigten die Modellratten signifikant erhöhte neurologische Defizitscores und Muskeltonusscores (P<0,01), signifikant verringerte Bewegungsdistanz im offenen Feld (P<0,01), geschwollene und unscharfe synaptische Strukturen, schwere Schädigung kortikaler Zellen, signifikante Erhöhung des Anteils der ATPase-Typ-I-Muskelfasern (P<0,01), signifikante Verminderung der Nestin-mRNA- und Proteinexpression (P<0,01) sowie signifikante Erhöhung der β-Catenin-mRNA- und Proteinexpression (P<0,01). Im Vergleich zur Modellgruppe reduzierte der Paeonia-Glycyrrhiza-Absud signifikant die neurologischen Defizit- und Muskeltonusscores der SCA-Ratten (P<0,01) und erhöhte signifikant die Bewegungsdistanz (P<0,01). Die Transmissionselektronenmikroskopie zeigte klarere und intakte synaptische Strukturen in der Absudgruppe, mit mehr Vesikeln und verbesserter Morphologie. Die HE-Färbung zeigte intakte, geordnete neuronale Strukturen mit reduzierter Zahl von vakuolisierten Zellen. Die ATPase-Färbung zeigte eine Abnahme des Anteils der Typ-I-Muskelfasern (P<0,01). Die Echtzeit-PCR zeigte eine signifikante Erhöhung der Nestin- und β-Catenin-mRNA-Expression (P<0,01). Immunhistochemie und Western Blot zeigten eine deutliche Erhöhung der Nestin- und β-Catenin-Proteinausdrucke (P<0,05, P<0,01). Schlussfolgerung: Paeonia-Glycyrrhiza-Absud könnte durch Regulierung der Proliferation und Differenzierung neuraler Stammzellen im M1-Kortex die neurologischen Defizite und Extremitätenspastik in SCA-Modellen verbessern.