Ziel ist es, den Wirkmechanismus des Da Huang Gan Cao-Absuds durch Deacetylierung des Tumorproteins p53 mittels Silent Information Regulator 3 (SIRT3) zur Abschwächung des Eisen-Todes bei chronischer Nierenerkrankung (CKD) zu untersuchen. Methoden: In In-vivo-Experimenten wurde ein CKD-Mausmodell durch Fütterung mit 0,2 % Adenin-Nahrung etabliert. 72 C57BL/6-Mäuse wurden zufällig in Kontrollgruppe, Modellgruppe, Niedrig-, Mittel- und Hochdosisgruppen des Da Huang Gan Cao-Absuds (0,975, 1,95, 3,90 g·kg^-1) und Valsartan-Gruppe (0,025 g·kg^-1) mit jeweils 12 Mäusen aufgeteilt. Die Nierenfunktion wurde durch Messung von Serum-Harnstoffstickstoff (BUN) und Serum-Kreatinin (SCr) bewertet; die Nierenpathologie wurde durch Hämatoxylin-Eosin (HE), Periodische Säure-Schiff (PAS) und Masson-Färbung bewertet; Nierenfibrose wurde durch Immunhistochemie für Typ-I-Kollagen (ColⅠ), Typ-III-Kollagen (ColⅢ) und α-glatte Muskelaktin (α-SMA) bewertet; die entzündliche Reaktion wurde durch ELISA-Messung von Serum-Entzündungsfaktoren wie Tumornekrosefaktor-α (TNF-α), Interleukin-1β (IL-1β) und Interleukin-6 (IL-6) bewertet; Lipidperoxidation und Eisenstoffwechsel wurden durch Messung der Aktivität von Superoxiddismutase (SOD), Malondialdehyd (MDA), Glutathion (GSH) und Gesamteisenspiegel im Nierengewebe bewertet; die Expression der Proteine SIRT3/p53, ac-p53 und Glutathionperoxidase 4 (GPX4) wurde mittels Western Blot bestimmt. In In-vitro-Experimenten wurde ein Ferroptose-Modell in HK-2-Zellen durch Erastin induziert, unterteilt in Kontrollgruppe, Modellgruppe, Niedrig-, Mittel- und Hochdosisgruppen des Da Huang Gan Cao-Serums (vorbereitet durch orale Verabreichung in 15 Ratten, die zufällig in 3 Gruppen mit jeweils 5 Ratten aufgeteilt waren, mit 0,675, 1,35, 2,70 g·kg^-1) und Fer-1-Gruppe (5 μmol·L^-1). Die Zellviabilität wurde mittels CCK-8-Test bestimmt, um die beste Induktions- und Behandlungsdosis auszuwählen; die Expression von SIRT3/p53, ac-p53 und GPX4 wurde mittels Western Blot untersucht; die nukleäre Translokation von p53 wurde durch konfokale Immunfluoreszenz bestimmt. Ergebnisse: In vivo zeigten die Modellgruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant erhöhte BUN- und SCr-Werte (P<0,01), schwere Nierenschäden und verstärkte Nierenfibrose. Lipidperoxidation und Eisenstörungen zeigten signifikante Abnahmen von SOD und GSH sowie signifikante Erhöhungen von MDA und Gesamteisenspiegel (P<0,05, P<0,01). Nach schrittweiser Intervention mit Da Huang Gan Cao verbesserten sich diese Indikatoren signifikant (P<0,05, P<0,01). In vitro zeigte die Modellgruppe eine signifikante Abnahme der Zellviabilität der HK-2-Zellen im Vergleich zur Kontrollgruppe, mit einer optimalen Erastin-Induktionsdosis von 0,4 μmol·L^-1 und der höchsten Dosierung des Da Huang Gan Cao-Serums als bester Behandlungsdosis. Die Zellviabilität in allen Serumsgruppen war signifikant höher als in der Modellgruppe (P<0,05, P<0,01). Mechanistische Studien zeigten eine signifikante Abnahme der Expression von SIRT3 und GPX4 sowie eine signifikante Zunahme der Expression von p53, ac-p53 und nuklearer Translokation von p53 in den Modellen (P<0,01). Nach Intervention mit Da Huang Gan Cao wurden diese Veränderungen signifikant umgekehrt (P<0,05, P<0,01). Fazit: Da Huang Gan Cao zeigt einen schützenden Effekt gegen Ferroptose in einem Adenin-induzierten CKD-Mausmodell und in Erastin-induzierten HK-2-Zellen, der Mechanismus ist mit dem anti-ferroptotischen Effekt über den SIRT3/p53-Signalweg verbunden.

Da Huang Gan Cao; chronische Nierenerkrankung; Ferroptose; Silent Information Regulator 3 (SIRT3); Deacetylierung