Ziel der Studie ist es, den molekularen Mechanismus aufzudecken, durch den die chinesische Kräuterformel Qiang Jing Pian das Altern der Leydig-Zellen und des Hoden-Gewebes bei Ratten über den Signalweg der cyclinabhängigen Kinase 4/E2F-Transkriptionsfaktoren (CDK4/E2F) reguliert. Für Zellversuche wurden männliche SPF-SD-Ratten im Alter von 2 Monaten ausgewählt und nach dem Körpergewicht zufällig in eine Kontrollgruppe (erhielt gleichvolumige 0,9% Natriumchlorid-Injektionslösung) und eine Qiang Jing Pian-Gruppe (je 20 Tiere) eingeteilt. Ein Leydig-Zell-Alterungsmodell wurde durch Induktion mit 100 μmol·L^-1 H₂O₂ in TM3-Zellen etabliert, und die Modellvalidität wurde durch Western-Blot-Analyse der p16- und p21-Spiegel überprüft. N-Acetylcystein (NAC, 1 mmol·L^-1), ein Antioxidans, wurde als positiver Kontrollwirkstoff zur Entfernung reaktiver Sauerstoffspezies (ROS) verwendet. Die Zellen wurden mit Seren mit niedriger (2,5%), mittlerer (5%) und hoher (10%) Konzentration von Qiang Jing Pian behandelt. Die Testosteronspiegel im Zellüberstand wurden mittels ELISA bestimmt, und die Proteinexpression von CDK4, E2F1, E2F2 mittels Western Blot analysiert. Im Tierversuch wurden natürlich gealterte Ratten im Alter von 19 Monaten als Modellgruppe und 2 Monate alte Ratten als junge Gruppe verwendet; die positive Kontrolle bestand aus subkutaner Injektion von Testosteronpropionat in einer Dosis von 5,21 mg·kg^-1·d^-1; die Qiang Jing Pian-Gruppen in niedriger, mittlerer und hoher Dosis erhielten 0,72, 1,44 bzw. 2,88 g·kg^-1·d^-1 oral. Das Allgemeinbefinden der Ratten wurde beobachtet, und der Proteingehalt von CDK4, E2F1, E2F2 im Hodengewebe wurde mittels Western Blot gemessen. In den Zellversuchen zeigte die Modellgruppe im Vergleich zur normalen Gruppe eine signifikante Erhöhung der CDK4- und E2F1-Expression (P<0,05), während E2F2 leicht abnahm; im Vergleich zur Modellgruppe stieg CDK4 in der NAC- und Niedrigdosis-Gruppe signifikant an (P<0,05), stieg in der mittleren Dosis leicht an und nahm in der Hochdosis signifikant ab (P<0,05). In der NAC-Gruppe verringerte sich E2F1 signifikant (P<0,05) und E2F2 leicht, während in den niedrigen, mittleren und hohen Qiang Jing Pian-Dosierungen E2F1 und E2F2 signifikant absanken (P<0,05); im Vergleich zur NAC-Gruppe stieg CDK4 in der Niedrigdosis leicht an und sank in der Hochdosis signifikant ab (P<0,05), E2F1 verringerte sich signifikant in der Hochdosis (P<0,05), und E2F2 fiel in allen Dosierungen signifikant ab (P<0,05). Im Tierversuch verringerte sich CDK4 in der Modellgruppe gegenüber der jungen Gruppe signifikant (P<0,05), während E2F1 und E2F2 leicht anstiegen; im Vergleich zur Modellgruppe sinkt CDK4 in der Testosteronpropionat- und Niedrigdosis-Qiang Jing Pian-Gruppe signifikant (P<0,05), während CDK4 in der Mittel- und Hochdosis-Gruppe signifikant ansteigt, wobei die mittlere Dosis statistisch signifikant ist (P<0,05); E2F1 sinkt signifikant (P<0,05), E2F2 steigt leicht; im Vergleich zur NAC-Gruppe steigt die Expression von CDK4 in der Mittel- und Hochdosis-Qiang Jing Pian-Gruppe signifikant an (P<0,05), und das E2F1-Protein nimmt in der Mitteldosis signifikant zu (P<0,05), während E2F2 in allen Qiang Jing Pian-Gruppen abnimmt. Fazit: Qiang Jing Pian verbessert den Alterungsprozess der Leydig-Zellen und des Hodengewebes, indem es die CDK4-Expression hochreguliert und die E2F1- und E2F2-Spiegel hemmt.

Qiang Jing Pian natürliches Altern; Leydig-Zellen; cyclinabhängige Kinase 4 / E2F-Transkriptionsfaktor (CDK4/E2F) Signalweg