Ziel Diese Studie untersucht die regulierende Wirkung der Rezeptur Huanglian Jiedu Tang, die die Methode der Hitzeableitung und Entgiftung repräsentiert, auf die Migration von Immunzellen, den Schutz der Blut-Hirn-Schranke und die Wiederherstellung der Zellfunktion im Modell des ischämischen Schlaganfalls. Methode Es wurde ein Mausmodell des ischämischen Schlaganfalls durch vorübergehenden Verschluss der mittleren Hirnarterie (tMCAO) etabliert, wobei Gehirndurchblutung und neurologische Funktionen mittels Laser-Speckle-Bildgebung und neurologischer Punktwertung bewertet wurden. Die Hirngewebe wurden mittels Hämatoxylin-Eosin (HE) und Nissl-Färbung pathologisch beurteilt. Die Mäuse wurden in Sham-Gruppe, Modellgruppe, Huanglian Jiedu Tang-Gruppe und Ginkgo-Blattextrakt-Gruppe eingeteilt. Nach einer einwöchigen Anpassung erfolgte eine orale Verabreichung: Sham- und Modellgruppen erhielten Kochsalzlösung, die Huanglian-Gruppe erhielt 1,82 g·kg^-1, die Ginkgo-Gruppe 0,432 g·kg^-1 für 5 Tage, am 6. Tag nach der letzten Gabe wurde das tMCAO-Modell durchgeführt. Einzelzell-RNA-Sequenzierung wurde an Gehirngewebe und peripheren Immunzellen durchgeführt, dabei wurden Zellverteilung mittels UMAP und Odds Ratio (OR) analysiert, differentieller Expressionsanalyse zur Bewertung der Wirkung von Huanglian auf Endothelzellen, Perizyten und Makrophagen, kombiniert mit CellChat- und Decoupler-Tools zur Analyse der Zellkommunikation und Transkriptionsfaktor-Regulation. Schließlich wurden mRNA- und Proteinausdruck mit Echtzeit-PCR und ELISA validiert. Ergebnisse Im Vergleich zur Sham-Gruppe zeigte die Modellgruppe signifikant höhere neurologische Scores (P<0,01) und signifikant reduzierte Durchblutung (P<0,01) mit kortikaler Strukturstörung, verstärkter Vakuolisierung der Zellkörper und erhöhten Nissl-Körperchen; verglichen mit der Modellgruppe zeigten die Huanglian- und Ginkgo-Gruppen signifikante Reduktionen der neurologischen Scores (P<0,01) und eine deutliche Erholung des Blutflusses (P<0,01), verbesserte kortikale Struktur, verringerte Vakuolisierung und reduzierte Nissl-Körperchen. Einzelzelldaten zeigten, dass Huanglian Endothelzellen und Perizyten vor Abnahme schützt, die Expression funktionaler Gene wie PECAM1 und NOS3 in diesen Zellen wiederherstellt und die Expression von Chemokinen und Adhäsionsfaktoren wie CCL2 und CXCL2 senkt; bei Makrophagen reduziert Huanglian deren Chemotaxis zum Zentralnervensystem und verringert die Expression ihrer Chemokinrezeptoren und Entzündungsfaktoren wie IL-6, CCR2, CXCR2. Die Zellkommunikationsanalyse zeigte, dass Huanglian durch die genannten Effekte Perizyten- und Endothelzellschäden reduziert, deren Anziehung zu Makrophagen verringert, die Ligand-Rezeptor-Interaktionen der chemotaktischen Signalwege CCL, CXCL, CSF3 zwischen Perizyten-Makrophagen und Endothel-Makrophagen reduziert und so sekundäre Schäden verhindert. Im Vergleich zur Sham-Gruppe zeigten Modellmäuse eine signifikante Hochregulation der mRNA-Expression von IL-1β, IL-6, Tumornekrosefaktor α (TNF-α), CCL2, CXCL2, CSF3 (P<0,01) sowie eine signifikante Herunterregulation der mRNA-Expression funktionaler Gene von Endothel- und Perizytenzellen wie RGS5, PECAM1, VEGFB, NOS3 (P<0,01); im Vergleich zur Modellgruppe zeigten Huanglian- und Ginkgo-Gruppen signifikante Senkungen der inflammatorischen Moleküle und signifikante Erhöhungen der funktionalen mRNA (P<0,01). Auf Proteinebene zeigten Modellmäuse signifikant erhöhte expressionen von IL-1β, IL-6 und TNF-α im Vergleich zur Sham-Gruppe (P<0,01), während Huanglian- und Ginkgo-Gruppen eine signifikante Senkung dieser Proteine im Vergleich zur Modellgruppe zeigten (P<0,01). Fazit Huanglian Jiedu Tang schützt Endothelzellen und Perizyten bei ischämischem Schlaganfall, reduziert neuronale Schäden, hemmt deren Interaktion mit Makrophagen und verringert sekundäre Schäden im Zentralnervensystem.

Huanglian Jiedu Tang; ischämischer Schlaganfall; Einzelzelltranskriptom; zentral-periphere Interaktion