Ziel war die systematische Identifizierung der Hauptchemikalien in Linggui Shugan-Granulaten (LGZGG) und die Erforschung ihrer pharmakologischen Wirkstoffbasis zur Behandlung der metabolisch assoziierten Steatohepatitis (MASH). Methode war die systematische Analyse der chemischen Bestandteile von LGZGG mittels Ultra-Performance-Flüssigkeitschromatographie gekoppelt mit Quadrupol-Time-of-Flight-Tandem-Massenspektrometrie (UPLC-Q-TOF-MS/MS); unter Einsatz von Netzwerkanalyse-Technologie wurden Protein-Protein-Interaktionsnetzwerke (PPI) sowie ein „Formel-Krankheit-Bestandteil-Ziel“-Netzwerk konstruiert, um potenzielle pharmakologisch wirksame Substanzen und Kernziele der LGZGG-Behandlung von MASH vorherzusagen; großporige Adsorptionsharze wurden verwendet, um potenzielle bioaktive Substanzen anzureichern, und die Zusammensetzung der Bestandteile in der 50 %-Ethanol-Eluationsfraktion von LGZGG (LGZGG-50) wurde mittels UPLC-Q-TOF-MS/MS analysiert. Ein MASH-Mausmodell wurde durch 12-wöchige Fütterung mit fettreicher, cholesterinreicher und fructosehaltiger Diät etabliert, wobei die Modellmäuse zufällig in Normalgruppe, Modellgruppe, Positivmedikamentengruppe (MGL-3196, 1 mg·kg^-1), LGZGG-Gruppe (bezogen auf das Rohmedikament, 34 g·kg·d^-1) und LGZGG-50-Gruppe (bezogen auf das Rohmedikament, 34 g·kg·d^-1) eingeteilt wurden. Die Wirksamkeit der Behandlung von MASH in vivo wurde durch Messung der Serumspiegel von Aspartat-Aminotransferase (AST), Alanin-Aminotransferase (ALT), Gesamtcholesterin (TC), Triglyzeriden (TG), LDL-Cholesterin (LDL-C) und HDL-Cholesterin (HDL-C) sowie durch Beobachtung pathomorphologischer Veränderungen im Lebergewebe mittels Hämatoxylin-Eosin- (HE) und Sirius-Red-Färbung bewertet. Die Proteinexpression der AMP-aktivierten Proteinkinase (AMPK), phosphorylierten (p)-AMPK, Sirtuin 1 (SIRT1), Peroxisom-Proliferator-aktivierten Rezeptor α (PPARα) und Carnitin-Palmitoyltransferase 1A (CPT1A) im Lebergewebe wurde mittels Western Blot bestimmt, um die Regulation der Kernziele zu verifizieren. Es wurden 83 chemische Bestandteile in LGZGG identifiziert, darunter 20 Flavonoide, 13 Terpene, 17 organische Säuren, 7 Aminosäuren, 11 Glykoside, je 3 Nucleoside, aromatische Verbindungen und Alkaloide, je 2 Phenylpropanoide und Zucker sowie je 1 Nukleinsäure und Steroid. Die Netzwerkanalyse ergab 134 gemeinsame Ziele, darunter Schlüsselziele wie SIRT1, PPARα, NF-κB1-Untereinheit und Interleukin-6 (IL-6). KEGG-Enrichment betraf hauptsächlich AMPK-, PPAR- und andere Signalwege. Die topologische Analyse des „Formel-Krankheit-Bestandteil-Ziel“-Netzwerks zeigte, dass die potenziell wirksamen Substanzen in LGZGG gegen MASH Flavonoide und Terpene sind. Im angereicherten Bereich LGZGG-50 betrug der relative Gehalt an Flavonoiden und Terpenen im positiven und negativen Ionenmodus jeweils 74,00 % bzw. 62,41 %, was auf eine effektive Anreicherung der Gesamtflavonoide und Gesamterpene durch LGZGG-50 hinweist. Die in vivo pharmakologischen Ergebnisse zeigten, dass sowohl die LGZGG- als auch die LGZGG-50-Gruppe das Körpergewicht, das Lebergewicht sowie die Serumspiegel von TG, GLU und ALT im Vergleich zur Modellgruppe signifikant senkten (P < 0,05), LGZGG erhöhte auch signifikant den HDL-C-Spiegel (P < 0,01), und beide Gruppen verbesserten die pathologischen Leberschäden; Western Blot-Ergebnisse zeigten im Vergleich zur Modellgruppe eine signifikante Zunahme der Proteinexpression von p-AMPK/AMPK, SIRT1, PPARα und CPT1A in der LGZGG-Gruppe (P < 0,05, P < 0,01) und eine signifikante Erhöhung der Expression von p-AMPK/AMPK und CPT1A in der LGZGG-50-Gruppe (P < 0,01). Fazit: LGZGG hat eine deutliche verbessernde Wirkung auf MASH, die Hauptwirkstoffe sind vermutlich Flavonoide und Terpene, der Wirkmechanismus könnte mit der Regulierung des AMPK/SIRT1/PPARα-Signalwegs zusammenhängen sowie mit der Verbesserung des Lipidstoffwechsels und der pathologischen Schädigung im Lebergewebe.

Linggui Shugan-Granulat; chemische Bestandteile; Identifizierung; metabolisch assoziierte Steatohepatitis; Ultra-Performance-Flüssigkeitschromatographie-Quadrupol-Time-of-Flight-Tandem-Massenspektrometrie (UPLC-Q-TOF-MS/MS)