Ziel der Studie war es, mit Hilfe von Proteomik-Techniken die Mechanismen der phasenabhängigen Wirksamkeitsunterschiede der Qi Jia Rou Gan-Formel gegen Leberfibrose zu untersuchen. Ein phasenabhängiges Modell der Leberfibrose bei Ratten wurde durch subkutane Injektion von Tetrachlorkohlenstoff (CCl₄) und Olivenöl etabliert. 104 SD-Ratten wurden zufällig in 13 Gruppen eingeteilt: Normale Gruppe (Kontrollgruppe), Modellgruppen für Woche 2, 4, 6, 8 (Model-2W, 4W, 6W, 8W), Qi Jia Rou Gan-Gruppen für Woche 2, 4, 6, 8 (QRF-2W, 4W, 6W, 8W), Komplexe weiche Kapselgruppen Bie Jia Rou Gan für Woche 2, 4, 6, 8 (FBR-2W, 4W, 6W, 8W). Nach zweiwöchiger medikamentöser Intervention wurden Lebergewebe und Blutproben aus der Bauchaorta der Ratten entnommen. Hämatoxylin-Eosin (HE), Masson- und Sirius-Rot (PSR)-Färbungen wurden verwendet, um pathologische Leberschäden und Kollagenfaserablagerungen zu beobachten; immunhistochemische (IHC) Detektion von Leberfibrose-Marker. Automatische biochemische Analysatoren wurden zur Messung der Leberfunktionsparameter im Serum eingesetzt; Enzymgebundener Immunosorbent-Assay (ELISA) zur Bestimmung der Serum-Level von Leberfibrose-Markern. Lebergewebe der Kontrollgruppe, Modellgruppen und QRF-Gruppen wurden mittels markierungsfreier quantitativer Proteomikanalyse analysiert, Schlüsselproteine wurden mittels Western Blot validiert; abschließend wurde eine bioinformatische Analyse der differentiellen Proteine durchgeführt. Ergebnisse: (1) Das durch CCl₄ plus Olivenöl erzeugte phasenabhängige Modell der Leberfibrose bei Ratten zeigte in der 2., 4., 6. und 8. Woche pathologische Ergebnisse entsprechend den Metavir-Stadien F1, F2, F3, F4; im Vergleich zur Kontrollgruppe wiesen die Modellgruppen eine signifikante Erhöhung der Expression von α-glatten Muskelaktin (α-SMA) und Kollagen Typ I (Collagen Ⅰ) (P<0,05) sowie eine deutliche Erhöhung der Serum-Leberfunktionsparameter ALT, AST, ALP, DBIL, TBil (P<0,01) und der Leberfibrose-Marker PⅢP, Ⅳ-C, HA, LN (P<0,05, P<0,01) auf. Das phasenabhängige Leberfibrosemodell wurde erfolgreich etabliert. (2) Im Vergleich zu den Modellgruppen zeigten die medikamentös behandelten Gruppen zu den gleichen Zeitpunkten eine Abnahme der ballonartigen Veränderung der Hepatozyten, eine geordnetere Hepatozytenanordnung und eine verminderte Entzündungsinfiltration; blau gefärbte Kollagenfasern wurden deutlich dünner, die bindegewebigen Septen schrumpften; die Kollagenfaserfläche und die PSR-Färbefläche wurden reduziert (P<0,05). Positive Flächen für α-SMA und Collagen I nahmen signifikant ab (P<0,05), und die Werte von ALT, AST, ALP, DBIL, TBil sowie PⅢP, Ⅳ-C, HA, LN sanken signifikant (P<0,05, P<0,01). Die Verbesserungen waren in Stadium F3 am deutlichsten (P<0,01). (3) Proteomik-Ergebnisse zeigten, dass 165 differentielle Proteine eine Regulationsrichtung zwischen den vier Modellgruppen und der Kontrollgruppe sowie zwischen den QRF- und Modellgruppen zeigten; Western Blot bestätigte die Proteinlevel von NQO1, MAPK1, Arg1, GSTA1 entsprechend den Proteomik-Ergebnissen. Die bioinformatische Analyse zeigte eine Anreicherung der 165 differentiellen Proteine in mehreren Signalwegen, darunter Arzneimittelmetabolismus - Cytochrom P450, Arginin-Biosynthese und PPAR-Signalweg, die eng mit Leberfibrose verbunden sind, und deutet darauf hin, dass Qi Jia Rou Gan Fang möglicherweise durch Modulation dieser Signalwege eine phasenabhängige Regulation der Leberfibrose ausübt. Die Ergebnisse legen nahe, dass die Formulierung über die Regulation des Arzneimittelmetabolismus - Cytochrom P450, der Arginin-Biosynthese und des PPAR-Signalwegs die Leberfibrose phasenabhängig steuert.

Proteomik; Qi Jia Rou Gan Fang; Leberfibrose; Phasenmodell; phasenabhängige Regulation