Erstellung eines Mäusemodells für psoriasiforme Läsionen induziert durch kombinierte Kälteeinwirkung und Imiquimod sowie Bewertung der Wirksamkeit der Kernformel Kaixuan Jiedu

SUN Meiqi ,  

XIAO Xue ,  

WU Jiarong ,  

LI Jiaqi ,  

ZHANG Ningxin ,  

JIANG Mengyao ,  

LIU Huan ,  

YANG Bin ,  

SONG Ping ,  

摘要

Ziel war die Etablierung eines murinen Psoriasis-ähnlichen Modells durch kombinierte anhaltende und intermittierende Kälteeinwirkung zusammen mit Imiquimod (IMQ) und die Bewertung der intervenierenden Wirkung der Kernformel Kaixuan Jiedu (KXJD) auf diese beiden Kältemodelle. Methode: Männliche C57BL/6J-Mäuse wurden ausgewählt und in zwei Chargen unterteilt. Die erste Charge bestand aus 36 Mäusen, die zufällig in eine Normaltemperaturgruppe, eine anhaltende Kältegruppe (10 ℃/24 h) und eine intermittierende Kältegruppe (10 ℃/6 h) eingeteilt wurden. Jede Gruppe wurde weiter in normale und Modell (topische IMQ-Anwendung zur Induktion von Hautläsionen) Untergruppen mit jeweils 6 Mäusen zur Modellerstellung und -bewertung unterteilt. Die zweite Charge bestand aus 54 Mäusen, 6 pro Gruppe, wobei auf den Temperaturgruppen basierend eine KXJD-Gruppe (30,42 g·kg-1, kontinuierliche orale Verabreichung über 5 Tage) hinzugefügt wurde. Die Bewertung erfolgte durch den Schweregradindex der Psoriasisläsionen (PASI), Infrarot-Thermografie zur Messung der Hauttemperatur, Hämatoxylin-Eosin (HE)-Färbung zur Untersuchung der Histopathologie, Immunhistochemie zur Detektion des vaskulären endothelialen Wachstumsfaktors (VEGF) und des Thrombozyten-Endothel-Zell-Adhäsionsmoleküls (CD31), Immunfluoreszenz zum Nachweis der epidermalen Tight-Junction-Proteine Claudin-1 und Occludin, ELISA zur Bestimmung von Serum-Tumornekrosefaktor-α (TNF-α) und Interleukin-10 (IL-10) sowie Echtzeit-Quantitativer PCR (Real-time PCR) zur Messung der mRNA-Expression von IL-17A, IL-23, IL-6 und dem Chemokin-Liganden 20 (CCL20) im verletzten Hautgewebe. Ergebnisse: In allen Temperaturgruppen zeigten die Mäuse typische psoriasiforme Hautläsionen. Im Vergleich zur Normalgruppe stiegen die PASI-Werte in den Modellgruppen, die Hauttemperatur sank signifikant (P<0,05), das Epithel verdickte sich, es zeigte sich eine unvollständige Verhornung und eine deutliche Infiltration inflammatorischer Zellen in der Dermis. Die Expression der inflammatorischen mRNA-Faktoren IL-17A, IL-23, IL-6 und CCL20 stieg signifikant an (P<0,05). Die Kälteeinwirkung verschärfte das Psoriasismodell: Die PASI-Gesamtpunktzahl der intermittierenden Kältegruppe war signifikant höher als die der Normaltemperaturmodellgruppe (P<0,05), das Serum-IL-10 zeigte keinen kompensatorischen Anstieg, CD31-Expression war deutlich erhöht (P<0,05), während VEGF nicht synchron zunahm; in der anhaltenden Kältegruppe war die Kapillarverkrümmung und -erweiterung in der Dermis ausgeprägter, und die mRNA-Expressionsniveaus von IL-17A, IL-23, IL-6 und CCL20 erreichten in dieser Gruppe den höchsten Stand. Im Vergleich zu den Modellgruppen zeigte die KXJD-Intervention eine deutliche Verbesserung der Hautläsionen, verminderte die Epidermisdicke und die Infiltration inflammatorischer Zellen, erhöhte die Hauttemperatur, wobei der Temperaturanstieg im intermittierenden Kälte-KXJD-Stammpunkt besonders ausgeprägt war (P<0,05), die Expression von VEGF und CD31 wurde herunterreguliert, die Expression von Claudin-1 und Occludin wiederhergestellt, die mRNA-Spiegel von IL-17A und IL-23 sanken signifikant (P<0,05), und das Serum-TNF-α war reduziert. Fazit: Es wurde erfolgreich ein kombiniertes psoriasiformes Mäusemodell etabliert, das durch Kälteeinwirkung zusammen mit IMQ induziert wird. Die Studie bestätigte, dass Kälte den Verlauf der Psoriasis durch Verstärkung von Xuanfu-Stauung, Mikrozirkulationsstörung und Immunungleichgewicht verschlechtert, wobei unterschiedliche Kältemodelle unterschiedliche Mechanismen aufweisen: Anhaltende Kälte fokussiert auf die Verstärkung der IL-23/IL-17-Achsen-Entzündungsreaktion und die Angiogenese und simuliert eine chronische Verschlechterung unter langfristiger Kälteeinwirkung; intermittierende Kälte neigt dazu, die Immunregulation zu schädigen und mikrovaskulären Endothel-Stress zu induzieren, was akuten Schüben entspricht, die durch plötzliche Temperaturänderungen verursacht werden. KXJD kann durch Öffnung von Xuanfu, Regulierung der Vasomotorik und Korrektur abnormaler immuninflammatorischer Reaktionen wirksam psoriasiforme Hautläsionen unter Kältebedingungen lindern.

关键词

Kälteeinwirkung;Temperaturänderung;Psoriasis;Kernformel Kaixuan Jiedu;Modellerstellung

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