Le but de cette étude était d'explorer l'effet régulateur de la décoction combinée d'Artemisiae annuae (AA) et d'herba ephedrae (HE) (méthode de purification-méthode de réchauffement-méthode combinée) sur l'expression des lymphocytes T régulateurs (Treg) / lymphocytes T auxiliaires 17 (Th17) dans la culture ex vivo des patients atteints de défaillance hépatique aiguë à rechute aiguë associée au VHB (VHB-DRAA). Méthodes Des échantillons de sang périphérique frais ont été collectés auprès de patients atteints de VHB-DRAA et les cellules mononucléaires ont été isolées par centrifugation sur gradient de ficoll. Les complexes Treg et les lymphocytes T CD4 naïfs ont été isolés par méthode d'immunomagnétisme. Les lymphocytes T CD4 naïfs ont été différenciés en cellules Th17 après expansion ex vivo, et les plasma médicamenteux de la méthode de purification (décoction d'AA), de la méthode de réchauffement (décoction d'HE) et de la méthode combinée (décoction combinée d'AA et de HE, c'est-à-dire la méthode de tonification-élimination de la toxine-dissipation de la stase) et des plasma de rats Wistar nourris à jeun (solution saline) ont été préparés, et les cellules de chaque groupe ont été traitées avec le plasma correspondant. La fréquence des lymphocytes Treg / Th17 a été mesurée par cytométrie en flux, l'expression du facteur de croissance transformant-β (TGF-β) a été mesurée par ELISA, l'expression de l'interleukine (IL)-10, de l'IL-17A, du facteur de nécrose tumorale-α (TNF-α), et de l'IL-23 a été mesurée par CBA, l'expression de l'ARNm forkhead box P3 (FoxP3) et du récepteur nucléaire des rétinoïdes-γt (ROR-γt) ont été mesurées par réaction en chaîne de polymérase quantitative en temps réel (RT-qPCR), et l'expression des protéines FoxP3 et ROR-γt a été mesurée par Western blot. Résultats Après l'intervention des plasmas médicamenteux de la méthode de purification, de la méthode de réchauffement et de la méthode combinée, par rapport au groupe témoin, les fréquences des lymphocytes Treg / Th17 du groupe de la méthode combinée ont diminué, les facteurs Treg TGF-β, IL-10 et les facteurs Th17 TNF-α, IL-17A, IL-23 ont diminué de manière significative, l'expression de l'ARNm et des protéines FoxP3, ROR-γt a diminué de manière significative (P < 0,01). Par rapport au groupe de la méthode de purification, les fréquences des lymphocytes Treg, l'ARNm et les protéines FoxP3 ont diminué dans le groupe de la méthode combinée, mais les différences n'étaient pas statistiquement significatives, les fréquences des lymphocytes Th17, les facteurs Treg TGF-β, IL-10 et les facteurs Th17 TNF-α, IL-17A, IL-23 ont diminué, l'expression de l'ARNm et des protéines ROR-γt a diminué de manière significative (P < 0,05, P < 0,01). Par rapport au groupe de la méthode de réchauffement, les fréquences des lymphocytes Treg, l'ARNm et les protéines FoxP3 ont diminué dans le groupe de la méthode combinée, mais les différences n'étaient pas statistiquement significatives, les fréquences des lymphocytes Th17, les facteurs Treg TGF-β, IL-10 et les facteurs Th17 TNF-α, IL-17A, IL-23 ont diminué, l'expression de l'ARNm et des protéines ROR-γt a diminué de manière significative (P < 0,05). Conclusion La méthode combinée peut réguler à la baisse l'expression spécifique des facteurs de transcription des lymphocytes Treg / Th17, inhiber l'hyperactivation des lymphocytes Treg / Th17, réduire la sécrétion des facteurs Treg TGF-β, IL-10, TNF-α, IL-17A, IL-23, atténuer la réaction inflammatoire de l'insuffisance hépatique, et améliorer le pronostic des patients.

défaillance hépatique aiguë à rechute aiguë associée au VHB;lymphocytes T régulateurs (Treg);lymphocytes T auxiliaires 17 (Th17);réaction inflammatoire;méthode de purification-méthode de réchauffement-méthode combinée