Effect of Compatibility of Effective Monomer Components of Fujin Shengjisan on Angiogenesis of HUVEC Based on Uniform Design

LU Xianying ,  

GAO Jing ,  

BAI Dingxi ,  

HOU Chaoming ,  

JI Wenting ,  

CHEN Huan ,  

WU Chenxi ,  

摘要

Le but de la conception uniforme est de déterminer la combinaison optimale des composants monomères efficaces (quercétine, kaempférol, acide de l'encens, acide oléorésineux) dans le pansement classique Fù Jǐn Shēng Jī Sǎn pour favoriser la cicatrisation des ulcères diabétiques (UD) et réaliser une application moderne. La méthode suit l'approche 'conception uniforme - essai pharmacologique - modélisation mathématique et vérification du modèle', en utilisant le plan de conception uniforme U14 (145) avec les quatre composants monomères des médicaments comme facteurs d'étude, la prolifération des cellules endothéliales de la veine ombilicale humaine (COV) induite par le glucose comme indicateur pharmacologique, la construction d'un modèle mathématique entre les composants monomères efficaces et l'indicateur pharmacologique à l'aide du logiciel DPS, et enfin une vérification des résultats de la conception uniforme par la méthode de détection de la prolifération et de l'activité cellulaire (CCK-8), la guérison des lacérations cellulaires, la formation de tubes, la technique d'immunobuvage des protéines (Western blot) et la réaction d'amplification en chaîne par polymérase en temps réel (Real-time PCR). Dans les 14 combinaisons, par rapport au groupe modèle de haut glucose, la différence de groupe 6 est statistiquement significative et leur effet de prolifération est le plus fort (P<0,05) ; après la modélisation du logiciel DPS, quatre équations de régression polynomiale de second ordre Y1~Y4 ont été finalement ajustées, et compte tenu de l'ajustement, de la stabilité du modèle et des besoins pratiques, les équations Y1~Y3 sont utilisées pour la vérification ultérieure ; en même temps, pour garantir la reproductibilité des expériences, la combinaison 6 est également utilisée pour la vérification ; et les combinaisons 6, les équations Y1~Y3 sont successivement renommées en nouvelles combinaisons ① ~ ④, pour appliquer la forme de combinaison monomère du pansement classique Fù Jǐn Shēng Jī Sǎn en médecine moderne. Les résultats des expériences de vérification montrent que les expériences de CCK-8, de guérison des lacérations et de formation de tubes montrent que, par rapport au groupe témoin, la viabilité cellulaire, le taux de cicatrisation et le nombre de tubes formés des COV après stimulation par 50 mmol·L-1 de glucose sont nettement réduits ; en outre, les niveaux d'expression des facteurs de croissance vasculaire VEGF2 et FGF2 et de CD31 sont également nettement réduits. Après l'intervention par les nouvelles combinaisons ① ~ ④, les nouvelles combinaisons ① et ③ améliorent nettement ces fonctions biologiques des COV endommagés par 50 mmol·L-1 de glucose. En outre, à partir des rapports de régression des nouvelles combinaisons ① et ③ et des doses relatives des composants monomères, il est déduit que l'acide oléorésineux, la quercétine et l'acide de l'encens ont tous un effet de promotion de la néovascularisation des COV dans un environnement à haut glucose, et ont un effet principal (le coefficient de corrélation partielle est positif, tous les > 0,9) ; l'acide oléorésineux et la quercétine, le kaempférol et l'acide oléorésineux promeuvent la néovascularisation des COV sous forme d'interaction (le coefficient de corrélation partielle est positif). En conclusion, les nouvelles combinaisons ① et ③ sont les meilleures combinaisons, qui peuvent atténuer l'effet inhibiteur du glucose élevé, stimuler la prolifération, la migration et la capacité de formation de tubes des COV dans un environnement à haut glucose, promouvoir l'expression de l'agent de croissance vasculaire endothélium A (VEGFA), le FGF2, le CD31, et ainsi exercer la capacité de promotion de la néovascularisation des COV, pour favoriser la cicatrisation des UD. Cette découverte non seulement a confirmé que les nouvelles combinaisons ① et ③ ont une bonne reproductibilité et une faisabilité, mais elle fournit aussi une nouvelle idée et une nouvelle méthode pour construire un modèle mathématique raisonnable afin d'étudier en profondeur la théorie chinoise de la combinaison de médicaments.

关键词

Fujin Shengjisan;diabetic ulcer;angiogenesis;uniform design

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