Effet de la formule Yishen Huayu sur l'autophagie des cellules transdifférenciées TCMK-1 basée sur la voie SIRT1/FoxO1

LI Qingru ,  

ZHANG Linqi ,  

LI Binyi ,  

GE Zihao ,  

摘要

L'objectif de cette étude était d'explorer l'effet protecteur et les voies d'action potentielles de la formule Yishen Huayu sur la transdifférenciation des cellules épithéliales du tubule rénal de souris (TCMK-1) induite par le facteur de croissance transformant-β1 (TGF-β1). Méthodes: un modèle de transdifférenciation des cellules TCMK-1 a été établi en utilisant une concentration massique de 10 μg·L-1 de TGF-β1 pour induire les cellules TCMK-1, avec un groupe témoin, un groupe modèle, un groupe à base de formule Yishen Huayu (sérum sanguin à 10% de formule Yishen Huayu), un groupe à base de losartan (sérum sanguin à 10% de losartan), un groupe EX527+TGF-β1, un groupe EX527+formule Yishen Huayu, et un groupe EX527. L'expression des protéines actine α-lisse (α-SMA), cadhérine E (E-cadhérine) et de la protéine liée aux microtubules 1 chaîne légère 3 (LC3) a été détectée par immunofluorescence. Les expressions de protéines et d'ARNm liées à la transdifférenciation, à l'autophagie et aux voies ont été mesurées par Western blot et PCR en temps réel. Résultats: Les résultats de PCR en temps réel et de Western blot ont montré que par rapport au groupe témoin, les expressions d'α-SMA, de la protéine p62 liée à l'ubiquitine, de l'ac-FoxO1 ont été significativement augmentées dans les groupes modèle, EX527+TGF-β1 et EX527 (P<0.01); par rapport au groupe modèle, les expressions d'α-SMA et de la protéine p62 ont été significativement réduites dans le groupe à base de formule Yishen Huayu et le groupe à base de losartan (P<0.05, P<0.01), et le niveau de protéine Ac-FoxO1 dans le groupe à base de formule Yishen Huayu a été considérablement réduit (P<0.05), alors que dans le groupe à base de losartan, il n'y avait pas de modification significative; par rapport au groupe à base de formule Yishen Huayu, il y avait des différences significatives dans l'expression de l'ARNm de p62, d'α-SMA et de p62. dans le groupe à base de losartan (P<0.05); par rapport au groupe témoin non traité, les expressions de LC3, de Beclin1, de SIRT1 (silencing information regulator factor 1), et de FoxO1 ont diminué considérablement dans les groupes modèle, EX527+TGF-β1, et EX527 (P<0.01); les expressions d'E-cadhérine dans les groupes modèle, EX527+TGF-β1 et EX527 ont considérablement diminué (P<0.01), et dans le groupe EX527, les variations n'ont pas atteint de signification statistique; par rapport au groupe modèle, les expressions d'E-cadhérine, de LC3, de Beclin1, de SIRT1 et de FoxO1 ont considérablement augmenté dans les groupes à base de formule Yishen Huayu et de losartan (P<0.05, P<0.01); par rapport au groupe à base de formule Yishen Huayu, il y avait des différences significatives dans l'expression d'ARNm de LC3, de SIRT1 et de FoxO1 dans le groupe à base de losartan (P<0.05, P<0.01). Les résultats de l'immunofluorescence étaient cohérents avec ceux des tests de Western blot et de PCR en temps réel. Conclusion: la formule Yishen Huayu pourrait atténuer la transdifférenciation des cellules TCMK-1 en activant la voie SIRT1/FoxO1 pour favoriser l'autophagie et désengorger la voie d'autophagie.

关键词

Formule Yishen Huayu; Cellules épithéliales du tubule rénal (TCMK-1); Voie SIRT1/FoxO1; Transdifférenciation; Autophagie

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