L'objectif de cette étude était d'identifier les principaux composants chimiques de l'Anmidan et d'explorer le mécanisme d'amélioration du rythme circadien des rats insomniaques par la régulation de la voie de signalisation extracellulaire de la kinase régulée par des signaux 1/2 (ERK1/2), de l'interaction de la kinase activée par la mitogène (MNK), et du facteur d'initiation de la traduction eIF4E (eIF4E). Méthodes : Les principaux composants chimiques de l'Anmidan ont été identifiés à l'aide de la chromatographie liquide ultra-efficace - piège linéaire ionique - orbite-trappe-technologie de spectrométrie de masse (UPLC-LTQ/Orbitrap/MS) combinée avec des échantillons de contrôle. Soixante rats mâles SD ont été répartis au hasard en un groupe témoin, un groupe modèle, un groupe mélatonine, des groupes à faible, moyen et fort dosage d'Anmidan, 10 rats par groupe, à l'exception du groupe témoin, tous soumis à un modèle d'insomnie par injection de 3,4,5-triiodothyronin (T3). Des expériences de champ libre et de rythmes circadiens ont été menées pour étudier les rythmes d'activité-repos des rats, les changements structurels des cellules neuronales de l'hypothalamus par coloration hématoxyline-éosine (HE) et coloration de Nissl, l'expression de l'ARNm et des protéines associées à la voie de signalisation ERK1/2/MNK/eIF4E dans l'hypothalamus par analyse d'immunofluorescence, PCR en temps réel et immunobuvardage des protéines (Western blot). Résultats : Au total, 50 composants chimiques tels que les flavonoïdes, les phénylpropanoïdes, les triterpénoides, les alcaloïdes et les lipides ont été identifiés dans l'Anmidan. Comparativement au groupe témoin, le groupe modèle a montré une augmentation significative de la distance totale parcourue, de la vitesse moyenne, du temps de séjour dans la zone centrale et de la durée accumulée de la position verticale (P<0,01), une prolongation significative du temps d'activité dans la lumière et dans l'obscurité (P<0,01); des changements rares dans l'arrangement des neurones de l'hypothalamus, une diminution de la quantité, une disparition partielle des noyaux ou une rupture des nucléoles, une augmentation significative de l'indice d'apoptose cellulaire (P<0,01), une turbidité intracytoplasmique, un éclaircissement de la couleur des grains de Nissl, une augmentation significative de l'indice d'apoptose des grains de Nissl (P<0,01); des niveaux d'expression de l'ARNm ERK1/2, MNK, eIF4E dans l'hypothalamus ont diminué (P<0,01), des niveaux d'expression des protéines ERK1/2, phosphorylée (p) -ERK1/2, MNK, phosphorylée (p) -MNK, eIF4E, phosphorylée (p) -eIF4E ont diminué (P<0,01); Comparativement au groupe modèle, le groupe à forte dose d'Anmidan a montré une diminution significative de la distance totale parcourue, de la vitesse moyenne, du temps de séjour dans la zone centrale et de la durée accumulée de la position verticale (P<0,01), une diminution significative de la distance totale parcourue, de la vitesse moyenne et de la durée accumulée de la position verticale pour tous les groupes sous différentes doses d'Anmidan (P<0,01), une diminution significative du temps d'activité dans la lumière pour tous les groupes sous différentes doses d'Anmidan (P<0,01), une prolongation significative du temps d'activité dans l'obscurité pour le groupe sous forte dose d'Anmidan (P<0,01), une diminution significative des différences de temps d'activité moyen entre le jour et la nuit pour les groupes sous différentes doses d'Anmidan, des neurones hypothalamiques fortement arranges, une augmentation de la quantité, une diminution significative de l'indice d'apoptose cellulaire dans l'hypothalamus (P<0,05, P<0,01), de l'hypothalamus cristallin pour tous les groupes sous différentes doses d'Anmidan, de Nissl à intensité de couleur plus foncée, une diminution significative de l'indice d'apoptose du grain de Nissl (P<0,01), pour les groupes à forte dose et à dose moyenne, les niveaux d'expression de l'ARNm et des protéines d'ERK1/2, MNK, eIF4E dans l'hypothalamus ont augmenté considérablement (P<0,05, P<0,01). Conclusions : L'Anmidan comprend principalement 50 composants chimiques tels que les flavonoïdes, les phénylpropanoïdes, les triterpénoides, etc., et présente les avantages de multiples composants et d'une 'augmentation coordonnée de l'efficacité' pour améliorer l'insomnie, et peut améliorer le trouble du rythme circadien des rats insomniaques induit par le PCPA en améliorant les protéines associées à la voie de signalisation ERK1/2/MNK/eIF4E.

Anmeidan;circadian rhythms;Hypothalamus;extracellular signal-regulated kinase 1/2 （ERK1/2）/mitogen-activated protein kinase （MAPK）-interacting serine/threonine-protein kinase （MNK）/eukaryotic translation initiation factor 4E （eIF4E）