Étude sur le mécanisme d'action de la prescription de médecine traditionnelle chinoise YTK dans le traitement du syndrome rénal diabétique basé sur la technologie de l'étiquetage quantitatif des protéines par marquage TMT

LI Lingyi ,  

YU Jiaxiang ,  

ZHANG Hanwen ,  

SHI Yan ,  

WANG Yilin ,  

WU Yi ,  

CHENG Yuefeng ,  

ZHENG Guangxin ,  

ZHANG Wenshun ,  

摘要

Le but de cette étude était d'observer l'efficacité du traitement du syndrome rénal diabétique (DKD) par la prescription de la formule à base de plantes médicinales YTK, et d'étudier en outre son mécanisme d'action. Après une période de 16 semaines, 45 souris mâles SPF db/db âgées de 16 semaines ont été sélectionnées de manière aléatoire et réparties en un groupe témoin, un groupe à doses élevées, moyennes et faibles de YTK (57,850; 28,925; 14,463 g·kg-1·j-1) et un groupe de nonaïrénalone (0,002 6 g·kg-1·j-1); neuf autres souris db/m ont été utilisées comme groupe témoin. Chaque groupe de traitement a été administré par gavage selon la dose correspondante, puis les échantillons ont été prélevés après une administration continue de 8 semaines. Les résultats des paramètres correspondants dans l'urine et le sérum des souris de chaque groupe, ainsi que les changements pathologiques dans les tissus de la rate, du pancréas et du rein, ont été utilisés pour évaluer le modèle DKD et l'efficacité du YTK. La technologie de l'étiquetage quantitatif des protéines par marquage TMT a été utilisée pour analyser les mécanismes d'action possibles, et les protéines associées à la membrane lysosomale 2A (LAMP2A), à la chaîne légère 3 Ⅱ des protéines associées aux microtubules (LC3 Ⅱ) et à la protéine de domaine de structure de chaleur de NOD-like receptor 3 (NLRP3) ont été sélectionnées pour une analyse immuno-fluorescente afin de valider les résultats de la technologie TMT. Comparé au groupe témoin, le groupe modèle a montré une augmentation significative du taux d'albumine/glycosurie dans l'urine (UACR), de la protéinurie neutrophile associée à la lipoprotéine de transport des lipides (NGAL), du taux de NGAL dans le sérum, de la créatine sérique (Cre-s), de l'acide urique (UA) et de l'urée (UREA) (P<0,01), et des changements pathologiques évidents dans le rein similaires à ceux de DKD, constituant un bon modèle DKD. Après l'intervention du YTK, tous ces indicateurs et les changements pathologiques ont considérablement été améliorés. Les résultats de l'analyse quantitative des protéines par marquage TMT suggèrent que le YTK agit en régulant l'autophagie, la biosynthèse de l'aminoacyl-tRNA, le métabolisme de la cystéine et de la méthionine, etc. Les résultats de la détection immuno-fluorescente des protéines associées à l'autophagie indiquent qu'en comparaison avec le groupe témoin, l'expression des protéines LAMP2A et LC3 Ⅱ a considérablement diminué dans le groupe modèle, et l'expression de la protéine NLRP3 a considérablement augmenté (P<0,01). Après l'intervention du YTK, l'expression des protéines LAMP2A dans tous les groupes de traitement a considérablement augmenté, l'expression des protéines LC3 Ⅱ a considérablement augmenté dans les groupes à doses élevées et moyennes de YTK, et l'expression de la protéine NLRP3 a considérablement diminué dans tous les groupes de traitement (P<0,01). En conclusion, le YTK peut améliorer efficacement les indicateurs de glycémie, réduire la protéinurie, ralentir la progression de la DKD, et son action est associée à la régulation de l'autophagie, mais les mécanismes spécifiques de régulation de l'autophagie nécessitent une étude plus approfondie.

关键词

YTK; syndrome rénal diabétique; technologie de l'étiquetage quantitatif des protéines par marquage TMT; autophagie

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