Régulation de la voie de signalisation SIRT1/Nrf2 par Semen Cuscutae-Lycii pour inhiber le stress oxydatif et atténuer les lésions de la barrière hémato-testiculaire chez les rats atteints d'oligospermie
L'objectif de cette étude est d'évaluer l'effet des graines extraites de Semen Cuscutae-Lycii sur la fonction de la barrière hémato-testiculaire chez les rats atteints d'oligospermie due au stress oxydatif, ainsi que de comprendre les mécanismes sous-jacents à cet effet. Méthodes 35 rats mâles SD ont été répartis en deux groupes : un groupe témoin (7 rats) et un groupe modèle (28 rats). Le modèle de rat souffrant d'oligospermie a été établi en leur donnant une solution hydrocortisonée saturée avec une culture de Levadura. Les rats ont été répartis dans le groupe modèle, le groupe granulé extrait de Semen Cuscutae-Lycii (3,2 g/kg) et le groupe flavonoïde total extrait de Semen Cuscutae-Lycii (0,34 g/kg), ainsi que le groupe de L-carnitine (0,38 g/kg), pendant 4 semaines. Un analyseur automatique de sperme a été utilisé pour évaluer la qualité du sperme des rats. La méthode immuno-enzymatique à liaison, également appelée ELISA (ou enzyme-linked immunosorbent assay), a été utilisée pour déterminer le niveau des enzymes SOD et GSH-Px dans les tissus testiculaires des rats. La coloration HE a été utilisée pour observer les changements pathologiques dans les tissus testiculaires des rats et pour enregistrer les scores de fonction spermatogénique. La microscopie électronique à transmission (TEM) a été utilisée pour observer les changements ultrastructuraux dans les cellules de soutien testiculaires des rats. La méthode d'immunomarquage protéique (Western blot) et la PCR quantitative en temps réel ont été utilisées pour analyser les niveaux d'expression des protéines SIRT1, Nrf2, Occludin, ZO-1, CX43, β-caténine et Occludin, ainsi que les niveaux d'expression des ARNm. Résultats Par comparaison avec le groupe témoin, les rats du groupe modèle présentaient une nette diminution du nombre total de spermatozoïdes et de leur motilité (P<0.05, P<0.01), une détérioration évidente de la structure des tissus testiculaires et de la barrière hémato-testiculaire, ainsi qu'une nette diminution du score de fonction spermatogénique (P<0.01), une nette diminution des niveaux de SOD et de GSH-Px dans les tissus testiculaires (P<0.05), une augmentation nette du niveau de MDA, une diminution nette des niveaux d'expression des protéines SIRT1, Nrf2, ZO-1, CX43, β-caténine, Occludin (P<0.05, P<0.01), une diminution nette des niveaux d'expression de l'ARNm des protéines SIRT1, Nrf2, ZO-1, CX43, β-caténine (P<0.05, P<0.01). Après traitement par les médicaments des différents groupes, l'amélioration des lésions tissulaires testiculaires et de la barrière hémato-testiculaire a été observée dans tous les groupes de traitement, et une augmentation significative du score de fonction spermatogénique a été notée par rapport au groupe modèle (P<0.01) ; par rapport au groupe modèle, une augmentation significative des niveaux de SOD et GSH-Px a été observée dans tous les groupes de traitement (P<0.05, P<0.01), une diminution des niveaux de MDA a été constatée dans le groupe granulé extrait de Semen Cuscutae-Lycii ; une augmentation significative des niveaux d'expression des protéines SIRT1, Nrf2, ZO-1, CX43, β-caténine, Occludin et des ARNm a été observée dans les tissus testiculaires du groupe granulé extrait de Semen Cuscutae-Lycii, du groupe flavonoïde total extrait de Semen Cuscutae-Lycii (P<0.05, P><0.01). Conclusions Les médicaments utilisés dans cette étude sont capables d'améliorer la fonction spermatogénique chez les rats atteints d'oligospermie. Il est pensé que le mécanisme repose sur la régulation des voies SIRT1/Nrf2 pour inhiber le stress oxydatif et atténuer les lésions de la barrière hémato-testiculaire, et le flavonoïde total peut être le fondement matériel qui peut permettre à Semen Cuscutae-Lycii de réaliser cette action thérapeutique.
关键词
Semen Cuscutae-Lycii; oligospermie; barrière hémato-testiculaire; stress oxydatif; facteur de régulation du silence / facteur apparenté à E2