Molecular Mechanism of Gypenoside L in Anti-Ovarian Cancer by Affecting GCK-Mediated Glycolytic Pathway

DONG Yuanguang ,  

SONG Nan ,  

YANG Ying ,  

ZHU Jingxuan ,  

WANG Jiaxin ,  

YUAN Mingdian ,  

SUN Yingying ,  

摘要

L'objectif est d'utiliser la voie de la glycolyse du cancer de l'ovaire (OC) comme point d'entrée pour discuter du mécanisme moléculaire du traitement du Gyp-L dans le CO. La méthode d'évaluation de la prolifération cellulaire (CCK-8) a permis de déterminer le taux de prolifération des cellules cancéreuses de l'ovaire humain (OVCAR3) pour déterminer la concentration d'intervention adaptée à l'expérience ultérieure. La clonage cellulaire et l'essai de cicatrisation ont été utilisés pour évaluer les capacités de prolifération et de migration des cellules OVCAR3. Les cellules OVCAR3 ont été divisées en un groupe vide, un groupe à faible concentration de Gyp-L (50 µmol·L-1), un groupe à concentration élevée de Gyp-L (100 µmol·L-1>) et un groupe cisplatine (15 µmol·L-1). Le kit de réactif utilisé a mesuré la consommation de glucose des cellules OC, la réaction en chaîne de polymérase quantitative en temps réel (PCR en temps réel) pour mesurer le niveau d'expression des ARNm des cellules OVCAR3, immuno-empreinte pour mesurer le niveau d'expression des protéines associées. Les résultats ont montré que Gyp-L ralentit considérablement le taux de cicatrisation des cellules OVCAR3 après l'intervention, ce qui reflète la capacité de Gyp-L à supprimer considérablement la migration des cellules OVCAR3 (P<0.01); Les résultats des expériences de clonage cellulaire ont montré que la capacité de formation de colonies cellulaires dans le groupe à faible concentration de Gyp-L, le groupe à forte concentration de Gyp-L et le groupe cisplatine a considérablement diminué (P<0.01); dans les cellules OVCAR3, la consommation de glucose et le niveau de production d'acide lactique ont considérablement diminué dans le groupe à faible concentration de Gyp-L et le groupe à forte concentration de Gyp-L par rapport au groupe vide (P<0.01), ce qui indique que Gyp-L peut supprimer efficacement le niveau de glycolyse des cellules OC. Dans le même temps, Gyp-L est capable de supprimer efficacement le niveau d'expression des ARNm et des protéines associées à la voie de la glycolyse des cellules OC, y compris les niveaux d'expression des ARNm et des protéines de la glucokinase (GCK), de la 6-phosphofructokinase-1 (PFKL), du facteur 3 de transduction du signal et d'activation de la transcription (STAT3), de la lactate déshydrogénase D (LDHD), de la phosphoglycérate mutase-1 (PGAM1) (P<0.05, P<0.01). Conclusion Gyp-L pourrait efficacement supprimer la voie de la glycolyse GCK de l'ovaire.

关键词

ovarian cancer;gypenoside L;glucokinase (GCK);glycolysis;cell proliferation

阅读全文