Mécanisme moléculaire par lequel l'Astragale-Herbe blanche régule l'axe LINC01134-CTCF-p21 pour inhiber la prolifération de l'adénocarcinome pulmonaire
L'objectif est d'étudier l'effet de l'ARN non codant LINC01134, qui concurrence la liaison du facteur CCCTC (CTCF), sur l'inhibiteur de la kinase dépendante de cycle (p21), et son impact sur la prolifération des cellules A549, afin d'examiner le mécanisme potentiel par lequel Astragale-Herbe blanche pourrait réguler cet axe pour inhiber la prolifération des A549. Méthodes : précipitation par immunoprécipitation des protéines liées à l'ARN (RIP) pour explorer l'interaction entre LINC01134 et CTCF ; ChIP pour étudier l'effet de la surexpression de LINC01134 sur l'interaction CTCF-p21 ; transfection lentivirale pour obtenir des lignées stables A549 oe-NC, oe-LINC01134, chaque groupe recevant 10% de sérum médicamenteux d'Astragale-Herbe blanche. PCR en temps réel et Western blot pour détecter l'effet d'Astragale-Herbe blanche sur les expressions de LINC01134, CTCF et p21 dans les cellules A549 ; tests de prolifération et activité cellulaire (CCK-8), formation de colonies pour évaluer l'effet via LINC01134 sur la prolifération A549 ; cytométrie en flux pour déterminer l'effet sur le cycle cellulaire ; Western blot pour évaluer l'impact sur les protéines du cycle. Résultats : comparé à IgG, le groupe oe-CTCF a montré une accumulation significative de LINC01134 (P<0,01) ; comparé à oe-Vector, le groupe oe-LINC01134 a présenté une diminution significative de l'accumulation de p21 liée à CTCF (P<0,01) ; comparé à 10% vide+oe-LINC01134, 10% Astragale-Herbe blanche+oe-LINC01134 a inversé l'expression de LINC01134 et p21 (P<0,05), sans effet notable sur CTCF ; le même groupe a inversé la viabilité cellulaire à 72 h (P<0,05), la prolifération maligne (P<0,05), la proportion de cellules en phases G0/G1, S (P<0,01) ; ainsi que l'expression des protéines Cyclin D1, CDK4, Cyclin E, CDK2, p-Rb, E2F3 (P<0,01). Conclusion : Astragale-Herbe blanche module l'axe LINC01134-CTCF-p21, bloquant la transition de phase G1/S dans le cycle cellulaire des A549, accélérant le vieillissement cellulaire et inhibant la prolifération maligne.
关键词
Astragale-Herbe blanche; axe de signalisation LINC01134-CTCF-p21; cycle; vieillissement; prolifération