Effect of lncRNA MANCR on Proliferation, Migration, and Epithelial Mesenchymal Transition of Gastric Cancer Cells by Regulating miR-150-5p/GPNMB Axis

LI Chao ,  

WANG Shihui ,  

LIN Jie ,  

WANG Fanke ,  

ZHANG Rui ,  

摘要

Le but de cette étude était d'explorer l'impact de l'ARN non codant long (lncRNA MANCR) lié à la mitose sur la prolifération, la migration et la transition épithéliale-mésenchymateuse (EMT) des cellules de cancer gastrique (GC) régulées par le microARN-50-5p (miR-150-5p) / la protéine mélanique non métastatique B (GPNMB). Méthodes L'expression de l'ARN lncRNA MANCR, miR-150-5p et GPNMB a été mesurée dans les tissus de GC et les tissus adjacents au cancer excisés en période de juin 2022 à septembre 2023 à l'hôpital de la première université médicale du Hebei par PCR en temps réel. Nous avons également mesuré l'expression de l'ARN lncRNA MANCR dans les cellules épithéliales de la muqueuse gastrique humaine GES-1 et les cellules de cancer gastrique humain BGC-823 en culture in vitro. Les cellules BGC-823 ont été réparties au hasard en quatre groupes : groupe Contrôle (culture normale), groupe sh-NC (transfecté par sh-NC), groupe sh-MANCR (transfecté par sh-MANCR), groupe co-transfecté sh-MANCR+anti-NC (co-transfecté par sh-MANCR et anti-NC) et groupe co-transfecté sh-MANCR+anti-miR-150-5p (co-transfecté par sh-MANCR et anti-miR-150-5p) ; nous avons analysé l'expression de l'ARN lncRNA MANCR, miR-150-5p et GPNMB dans les cellules BGC-823 de chaque groupe ; un test de coloration à l'EdU a été réalisé pour mesurer la prolifération des cellules BGC-823 ; l'expérience de Transwell a été utilisée pour mesurer l'invasion et la migration des cellules ; la méthode Western blot a été utilisée pour mesurer l'expression des protéines liées à l'EMT, y compris la cadhérine E (E-cadhérine), la cadhérine N (N-cadhérine), la vimentine et la protéine GPNMB ; enfin, l'interaction entre l'ARN lncRNA MANCR et le miR-150-5p, ainsi que entre le miR-150-5p et le GPNMB, a été analysée par un essai de rapporteur luciférase. Résultats par rapport aux tissus adjacents au cancer, l'expression de l'ARN lncRNA MANCR et du GPNMB dans les tissus de GC a augmenté de manière significative, tandis que l'expression du miR-150-5p a diminué de manière significative (P <0,05). Comparativement aux cellules épithéliales de la muqueuse gastrique humaine GES-1, l'expression de l'ARN lncRNA MANCR a augmenté dans les cellules BGC-823 (P <0,05). Comparativement aux groupes Contrôle et sh-NC, le taux de cellules BGC-823 positives à l'EdU, les cellules de migration, les cellules d'invasion, l'ARN lncRNA MANCR, l'ARN et la protéine GPNMB, les protéines N-cadhérine et vimentine ont diminué de manière significative, tandis que le miR-150-5p et la protéine E-cadhérine ont augmenté de manière significative dans le groupe sh-MANCR (P <0,05) ; comparativement aux groupes sh-MANCR et sh-MANCR+anti-NC, l'expression du miR-150-5p et la protéine E-cadhérine ont diminué significativement dans le groupe sh-MANCR+anti-miR-150-5p, alors que le taux de cellules BGC-823 positives à l'EdU, les cellules de migration, les cellules d'invasion, l'ARN et la protéine GPNMB, les protéines N-cadhérine et vimentine ont augmenté de manière significative (P <0,05). L'ARN lncRNA MANCR peut réguler négativement le miR-150-5p, et le miR-150-5p peut réguler négativement le GPNMB. Conclusion Le silence de l'ARN lncRNA MANCR peut inhiber la migration, la prolifération et l'EMT des cellules de GC en régulant l'axe miR-150-5p / GPNMB.

关键词

mitotically-associated long non-coding RNA;microRNA-50-5p;non-metastatic melanoprotein B;gastric cancer;proliferation;migration;epithelial mesenchymal transition

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