Mechanism of Yitangkang Prescription in Improving Metabolic-inflammatory Imbalance in Diabetic Kidney Disease by Cross-organ Regulation of Mast Cell Network

ZHAO Mengdi ,  

YU Jiaxiang ,  

ZHANG Hanwen ,  

SHI Yan ,  

WU Yi ,  

CHENG Yuefeng ,  

ZHANG Wenshun ,  

摘要

Le but de cette étude était d'explorer le mécanisme d'action du composé à base de plantes chinoises Yitangkang (YTK) dans l'amélioration du diabète rénal (DKD) en régulant la dégranulation des mastocytes (MC). La méthode a consisté à sélectionner des souris db/db de 16 semaines (modèle DKD, n=45) pour le groupe expérimental et des souris db/m (n=9) pour le groupe normal. En utilisant une table de nombres aléatoires, le groupe expérimental a été réparti aléatoirement en groupe de modèle, groupe à faible, moyen et fort dosage de YTK (14,463, 28,925, 57,850 g·kg-1·j-1) et groupe nonAplon. Après 8 semaines d'intervention par gavage, les méthodes suivantes ont été utilisées pour l'évaluation : chromatographie liquide-spectrométrie de masse (LC-MS/MS) pour identifier les principes actifs importants de YTK; coloration à l'hématoxyline-éosine (HE) pour observer les changements morphologiques dans les tissus spléniques et rénaux de souris; dosage immunoenzymatique (ELISA) pour détecter les niveaux sériques des cytokines inflammatoires interleukine-1β (IL-1β), interleukine-6 (IL-6), facteur de nécrose tumorale-α (TNF-α) et les taux de 5-hydroxytryptamine (5-HT), histamine (HIS) dans les tissus; test de marquage terminal in situ (TUNEL) pour observer l'apoptose des cellules rénales; immunohistochimie (IHC) pour analyser la densité optique moyenne des protéines rénales du Nephrin, de la Podocine, de la Caveoline-1, de la protéine de domaine de structure à chaleur NLRP3; analyse de métabolomique non ciblée pour analyser les changements métaboliques des tissus rénaux. La coloration au bleu de toluidine (TB) a été utilisée pour évaluer l'infiltration et la dégranulation des MC dans le tissu cardiaque, musculaire, hépatique, intestinal et rénal. Les résultats ont identifié 15 principes actifs importants de YTK grâce à la LC-MS/MS; la coloration HE a confirmé l'amélioration de la structure des tissus spléniques et rénaux des souris après le traitement par YTK, atténuant l'inflammation; la coloration TB a confirmé une réduction significative de l'infiltration et de la dégranulation des MC dans tous les tissus. YTK a réduit de manière significative les niveaux sériques d'IL-1β, IL-6, TNF-α et de 5-HT, HIS dans différents tissus (P<0.01), améliorant l'inflammation et la dégranulation des MC; la coloration TUNEL a montré que YTK réduisait l'apoptose des cellules rénales; l'IHC a montré que YTK régulait à la hausse l'expression du Nephrin, de la Podocine et à la baisse l'expression de Caveoline-1 et NLRP3 (P<0.01); l'analyse de métabolomique non ciblée a identifié de nombreux métabolites dont le changement était significatif, impliquant principalement le métabolisme du tryptophane, de l'histamine, de l'acide arachidonique et des interactions ligand-récepteur de neurotransmetteurs, etc. Conclusion YTK améliore le déséquilibre métabolique-inflammatoire du DKD en régulant le réseau MC à travers les organes.

关键词

Yitangkang prescription;diabetic kidney disease (DKD);mast cell (MC) degranulation;inflammation;oxidative stress;metabolic-inflammatory imbalance

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